单增李斯特菌膜裂解相关基因缺失突变株的构建及生物学特性鉴定

发布时间：2017-06-26 09:19

  本文关键词：单增李斯特菌膜裂解相关基因缺失突变株的构建及生物学特性鉴定，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：拟探明单核细胞增多性李斯特菌(单增李斯特菌)分离株M7可能的低致病力机制。利用SOE-PCR及同源重组法构建M7膜裂解相关基因hly及plcB单缺失(M7-Δhly和M7-ΔplcB)及双缺失突变株(M7-Δhly/plcB),比较它们与亲本株的生物学特性差异。结果如下:PCR及反转录PCR表明突变株构建成功。突变株M7-Δhly和M7-Δhly/plcB因hly缺失致其溶血活性丧失。plcB缺失突变株M7-ΔplcB和M7-Δhly/plcB无可见溶脂活性。单缺失突变株M7-ΔplcB、M7-Δhly与M7具有相似的细胞黏附及增殖能力(P0.05)。MOI为1 000时,双缺失突变株M7-Δhly/plcB对Caco-2细胞毒性最低(11.10%),M7-Δhly次之(23.53%)(P0.05)。空斑试验表明菌株M7和M7-ΔplcB仅能在无庆大霉素培养基中形成空斑。hly及plcB缺失致单增李斯特菌对免疫抑制小鼠毒力降低。单增李斯特菌M7低致病力可能与hly及plcB的高水平表达有关,致细菌对宿主细胞毒性增强而从细胞内逸出,使其不能躲避宿主免疫系统而被清除。
【作者单位】： 宁波卫生职业技术学院;浙江万里学院;舟山出入境检验检疫局;浙江大学动物预防医学研究所;
【关键词】： 单增李斯特菌 膜裂解相关基因 细胞毒性 生物学特性
【基金】：浙江省科技厅公益技术研究农业项目(2014C32047) 2015年度留学人员科技活动项目择优资助经费项目 浙江万里学院省重中之重学科开放基金(KF2014007) 宁波市自然科学基金(2015A610189) 浙江检验检疫局重点科研项目(2014-ZKZ-017)
【分类号】：R378.994
【正文快照】： 3.舟山出入境检验检疫局,舟山316000;4.浙江大学动物预防医学研究所,杭州310058)单核细胞增多性李斯特菌(简称单增李斯特菌)为重要的食源性病原菌,可致胃肠炎、败血症、脑炎和脑膜炎,老人、儿童和免疫抑制人群最易感,孕妇感染后致流产。虽然发生率不高,但死亡率较高[1]。单增

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本文编号：485629