通用引物多重PCR新技术对番木瓜转基因成分检测的研究
本文关键词:通用引物多重PCR新技术对番木瓜转基因成分检测的研究,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:为了满足能够同时对多个靶标进行检测,克服传统多重PCR的引物间排斥、重现性差等缺点的要求,建立通用引物多重PCR新方法对番木瓜中转基因成分进行高效、快速的检测。选用三种转基因番木瓜(Event 55-1、"GM-YK"和"华农一号")和非转基因番木瓜("台农2号")的新鲜叶片为研究对象,根据三种转基因番木瓜的外源基因和内标木瓜蛋白酶基因(papain)序列,设计五种特异性引物。通过比较不加入接头的特异性引物的PCR验证结果,发现复合引物(带通用接头的引物)无论在单重PCR或者多重PCR的检测中的电泳条带均更为明亮清晰。而由灵敏度的对比,可以得出通用引物多重PCR灵敏度比普通引物的灵敏度提高了1个数量级。通用引物多重PCR新技术较普通多重PCR方法检测番木瓜中转基因成分拥有更低的检测限和灵敏度,为转基因成分的快速检测提供一种新技术。
【作者单位】: 暨南大学食品科学与工程系;广东工业大学轻工化工学院;
【关键词】: 转基因 检测 多重PCR 通用引物
【基金】:十二五国家科技支撑课题(2012BAD36B04) 广东高校优秀青年创新人才培育项目(LYM10033) 暨南大学科研培育与创新基金(21609418)
【分类号】:TS255.7
【正文快照】: 番木瓜广泛存在于热带、亚热带地区,富含维生素A、维生素和β-胡萝卜素[1],不仅可以食用,还广泛地应用于医药,食品以及其它工业领域[2]。然而,番木瓜环斑病毒Papaya ring spot virus(PRSV)的出现,对其规模化种植造成了巨大的威胁,极大地影响了番木瓜的市场经济效益[3]。1998年
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