与甘蔗抗黑穗病性相关的14-3-3基因的克隆和表达分析

发布时间：2017-06-30 04:07

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【摘要】：为了解14-3-3基因在甘蔗黑穗病抗性中的作用,本研究以课题组前期构建的甘蔗抗黑穗病抑制消减杂交文库中筛选出的1个与14-3-3基因同源的EST序列作为探针,利用电子克隆和RT-PCR方法从甘蔗ROC22品种中分离到1个Sc14-3-3基因(Gen Bank Accession Number:KJ577592),并对其序列信息和基因表达情况进行分析。结果显示,该基因ORF长771 bp,编码256个氨基酸残基;Sc14-3-3是定位于细胞质的亲水蛋白,无跨膜螺旋区及信号肽,有10个Ser、3个Thr和7个Tyr潜在的磷酸化位点,并在N-端有4个蛋白结合区和1个多核苷酸结合区,对翻译和能量新陈代谢起着重要作用;该蛋白属非ε类群,其N-端和中间区域在不同物种间相对保守,C-端差异相对较大。基因表达模式分析显示,Sc14-3-3基因可能参与甘蔗对生物逆境的细胞免疫响应,其对Me JA介导的信号途径应答较SA和ABA早;黑穗病菌胁迫下,Sc14-3-3基因在甘蔗抗感品种中的表达模式存在差异,其在抗黑穗病品种YC05-179中上调表达且表达量变化明显,揭示了该基因参与甘蔗对黑穗病的应答反应。以上结果为甘蔗Sc14-3-3基因的功能研究积累了一定的基础资料,并为今后甘蔗的抗病分子育种提供后备基因资源。
【作者单位】： 福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室国家甘蔗产业技术研发中心;福建医科大学附属协和医院;
【关键词】： 甘蔗 --基因 生物信息学 荧光定量PCR
【基金】：国家自然科学基金(No.31340060) 福建省杰出青年科学基金(No.2015J06006) 福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划(No.JA14095) 农业部甘蔗生物学与遗传育种重点实验室开放课题(No.MOAFJSBGB-201501)
【分类号】：S435.661
【正文快照】： 1967年,Mooore等[1]在牛脑细胞中首次发现一种大小在25~32 ku之间的异源二聚体酸性可溶蛋白,根据二乙氨乙基纤维素柱(DEAE cellulose)层析分离出片段数及其在淀粉凝胶电泳上的迁移率,命名为14-3-3蛋白。在之后的很长一段时间里,14-3-3蛋白被认为是一种脑特异蛋白,直到它首次在

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