BMPR-IB基因的克隆及其在绒山羊成纤维细胞中的表达

发布时间：2017-07-01 01:11

  本文关键词：BMPR-IB基因的克隆及其在绒山羊成纤维细胞中的表达，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本研究旨在克隆BB基因型小尾寒羊的BMPR-IB基因编码区,构建重组载体,瞬时转染绒山羊成纤维细胞,并对BMPR-IB等基因的表达情况进行检测。采用RT-PCR方法扩增BMPR-IB基因完整编码区,构建真核表达载体pEGFP-BMPR-IB,经脂质体Lipofectamine LTXPLUS介导转染绒山羊成纤维细胞,并分别于转染后48和72h收集细胞,分别提取RNA和蛋白,利用RT-PCR和Western blot方法检测相关基因的表达情况。结果扩增得到了包含BMPR-IB基因完整编码区全长在内的1 550bp片段,与已知序列高度同源;Real-time PCR检测结果均表明,转基因组细胞中BMPR-IB表达量显著高于空白对照组(P0.01),IGF-Ⅰ基因表达量也显著上调(P0.01),TLR4、IFN、MHC、PNRP、GDF5、INH基因的表达量显著降低(P0.01);Western blot检测表明,转染组BMPR-IB、IGF-I的表达有所增加,BMP4、TLR4的表达略有降低,但差异均不显著(P0.05)。本研究成功实现了小尾寒羊BMPR-IB基因在山羊成纤维细胞中的表达,为转BMPR-IB基因阳性细胞株和细胞系的建立提供了基础;研究表明BMPR-IB(BB型)基因的过表达能上调IGF-Ⅰ基因的表达,下调TLR4基因的表达。
【作者单位】： 河北农业大学动物科技学院;河北省畜牧兽医研究所;
【关键词】： BMPR-IB基因 真核表达载体 绒山羊成纤维细胞 表达
【基金】：国家肉羊产业技术体系资助项目(CARS-39)
【分类号】：S827
【正文快照】： FecB基因最早是在澳大利亚Booroola羊中发现的一个与高繁殖率相关的主效基因,能显著提高羊的繁殖率。后来的研究证明FecB基因的本质为骨形态蛋白Ⅰ型受体基因(Bone morphogeneticprotein receptor-IB,BMPR-IB)。BMPR-IB基因属于转移生长因子β亚基(TGF-β)受体家族成员,存在于

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