密码子优化的纳豆激酶基因在番茄果实中的瞬时表达
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【摘要】:根据植物偏爱密码子设计并人工合成了纳豆激酶基因sNK,在其中插入番茄内含子构成sNKi基因.将这两种基因通过农杆菌渗透法在不同成熟时期的番茄果实中实现了瞬时表达.通过实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)比较两种基因在番茄果实中转录水平的表达量,通过纤维蛋白平板法检测两种基因表达产物的纤溶酶活性.结果表明,两种基因在番茄果实的转色期、成熟期和完熟期均有表达,其中成熟期表达量最高,破色期基本无表达.果实特异性E8启动子调控下的纳豆激酶基因的表达量较组成型35S启动子调控下的该基因表达量明显提高.插入内含子的sNKi基因的表达量高于没有内含子的sNK基因,表明内含子在提高纳豆激酶的表达量方面具有显著的作用.
【作者单位】: 内蒙古大学生命科学学院内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室;呼和浩特职业学院生物化学工程学院;
【关键词】: 纳豆激酶 密码子优化 番茄 瞬时表达 农杆菌渗透法
【基金】:内蒙古自治区高等学校创新团队发展计划(No.NMGIRT1401)
【分类号】:Q943.2
【正文快照】: 血栓性疾病严重威胁着人类的健康与生命,是现今仅次于癌症的第二大病症[1].采用纤维蛋白溶解酶或其激活剂进行的溶栓疗法被认为是治疗血栓病最有效的方法.溶栓药物可激活纤溶系统,使血栓中交联成网的纤维蛋白溶解.目前常用的及一些还在研制开发的溶栓药物如链激酶(SK)、尿激酶
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