对小鼠胚胎母型—合子型（MET）过渡时期抗氧化酶基因变化规律的研究

发布时间：2017-07-15 08:16

  本文关键词：对小鼠胚胎母型—合子型（MET）过渡时期抗氧化酶基因变化规律的研究

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【摘要】：本实验以小鼠早期胚胎为试验材料,检测小鼠早期胚胎内部活性氧水平、抗氧化酶基因的表达量及过氧化物酶体膜蛋白-20(PMP-20)基因的表达量,揭示小鼠胚胎MET发育阶段过氧化物酶体的变化规律。同时检测活性氧(以H2O2为例)对这一时期胚胎内抗氧化酶基因表达量和过氧化物酶体数量变化的影响,为诠释哺乳动物早期胚胎抗氧化提供新的事实及理论依据。通过本实验得到以下实验结果：1、分别用浓度为0、10-5%、10-7%、10-9%的H2O2处理的小鼠胚胎,确定对小鼠胚胎体外发育有效H2O2浓度选择为10-7%;2、体内处理组,4-cell胚胎内活性氧含量显著高于2-cell早期和晚期,且2-cell早期和晚期胚胎内活性氧含量无显著性差异;体外处理组和H2O2处理组,均是2-cell晚期胚胎内活性氧含量显著高于2-cell早期和4-cell期,且2-cell早期与4-cell期胚胎内活性氧含量无显著性差异。处于同一时期的胚胎,2-cell早期和晚期,体外组胚胎内活性氧含量显著高于体内组,4-cell期胚胎内活性氧含量没有显著性差异；3、无论早期胚胎是否用H2O2处理,CAT、Mn-SOD、GPX-1、GPX-4、PMP-20基因均在4-cell胚胎的表达量高于2-cell早期胚胎和晚期胚胎,但CAT基因在2-cell胚胎内未表达,Mn-SOD、GPX-1、PMP-20基因在2-cell胚胎早期的表达量均高于2-cell晚期,GPX-4基因在2-cell早期胚胎和晚期胚胎的表达量并没有什么区别；而Cu/Zn-SOD基因在4-cell胚胎内表达量显著低于2-cell早期胚胎和晚期胚胎,但体外处理组2-cell早期胚胎内Cu/Zn-SOD基因表达量显著高于2-cell晚期,而H2O2处理组则相反；4、处于同一时期的胚胎,Mn-SOD、GPX-1、PMP-20基因的表达量均是H2O2处理组高于体外处理组；CAT、GPX-4基因的表达量只有在4-cell时期时,H2O2处理组高于体外处理组;Cu/Zn-SOD基因的表达量只有在2-cell早期,体外处理组显著高于H2O2,处理组。结论：不同抗氧化酶基因在2-cell到4-cell发育阶段的表达均有所不同,PMP-20基因在2-cell晚期表达量达到低谷,间接说明这一时期过氧化物酶体含量最少。
【关键词】：小鼠 早期胚胎 活性氧 抗氧化酶基因 过氧化物酶体 母型-合子型过渡
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：Q954.4
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-10
• 第一章 前言10-22
• 1.1 活性氧和自由基简介10-12
• 1.2 活性氧对胚胎发育的影响12-14
• 1.2.1 DNA12-13
• 1.2.2 蛋白质13
• 1.2.3 脂质13
• 1.2.4 活性氧与胚胎发育阻滞的关系13-14
• 1.3 哺乳动物的MET时期14-15
• 1.4 细胞内抗氧化物质15-19
• 1.4.1 超氧化物歧化酶(SOD)15-16
• 1.4.2 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)16-18
• 1.4.3 过氧化氢酶(CAT)18-19
• 1.4.4 非酶类抗氧化剂19
• 1.5 胚胎抗氧化机制19-20
• 1.6 过氧化物酶体在早期胚胎发育中的抗氧化作用20
• 1.7 过氧化物媒体膜蛋白-20(PMP-20)研究进展20-21
• 1.8 本实验的目的及意义21-22
• 第二章 材料与方法22-33
• 2.1 试验材料与仪器22-24
• 2.1.1 试验时间及地点22
• 2.1.2 试验材料22
• 2.1.3 试验主要仪器22-23
• 2.1.4 试验主要药品23-24
• 2.2 主要试验药品配制及试验方法24-33
• 2.2.1 试验药品的配制24-28
• 2.2.2 试验方法28-33
• 第三章 结果与分析33-40
• 3.1 H_2O_2处理小鼠胚胎氧化损伤模型的建立33
• 3.2 小鼠MET时期胚胎内ROS含量的变化33-35
• 3.2.1 各处理组胚胎内ROS水平荧光图像及量化结果34
• 3.2.2 相同发育阶段体内、体外胚胎内活性氧水平的比较34-35
• 3.3 小鼠MET时期胚胎内抗氧化酶基因的表达35-39
• 3.3.1 小鼠胚胎内CAT基因的表达及量化分析35
• 3.3.2 小鼠胚胎内Cu/Zn-SOD和Mn-SOD基因的表达及量化分析35-37
• 3.3.3 小鼠胚胎内GPX-1和GPX-4基因的表达及量化分析37-39
• 3.4 小鼠MET时期胚胎内PMP-20基因的表达及量化分析39-40
• 第四章 讨论40-43
• 第五章 结论43-44
• 参考文献44-55
• 致谢55-56

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10 高建明，吴学清，吴登庆，谢富强;小鼠胚胎细胞数量的观察[J];北京实验动物科学与管理;1994年02期

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1 李均;汪维伟;;小鼠胚胎消化管上皮细胞凋亡相关基因表达的初步观察[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

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5 李专;兰雨;贺文艳;王俊;罗凌飞;杨晓;刘兵;;小鼠胚胎头部:一个新的造血干细胞发育位点[A];2012全国发育生物学大会摘要集[C];2012年

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7 吴燕;范文红;刘淑红;马子敏;范明;;小鼠胚胎整体原位杂交技术的引进与优化[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年

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本文编号：543072