猪Zfy基因干扰载体的构建及性控效果的验证

发布时间：2017-07-18 20:08

  本文关键词：猪Zfy基因干扰载体的构建及性控效果的验证

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【摘要】：为了探究Zfy基因在性别控制中的作用,试验运用RNAi技术,设计并合成了2对靶向猪Zfy基因的shRNA序列,构建了重组质粒(shRNA-a,shRNA-b),将其转染到体外培养的猪生精细胞中,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测生精细胞中Zfy基因mRNA的表达,然后选取4头健康公猪进行体内干扰试验,分为A组和B组,每组2头,将重组质粒注射到猪睾丸中,A组注射shRNA-a,B组注射shRNA-b,对照组为试验猪场不进行注射的公猪,观察子一代性别比例。结果显示,qRT-PCR检测shRNA-a和shRNA-b对生精细胞中Zfy基因的抑制效率分别为33%(P0.05)和89%(P0.005)。体内干扰试验中,对照组子一代仔猪雌性率为56.16%,A组、B组子一代仔猪雌性率分别为34.87%(P0.005)和47.22%(P0.05)。本试验成功构建干扰猪Zfy基因的重组质粒,并应用于动物试验,证实Zfy基因可以影响后代的性别比例,在动物性别控制中发挥一定的作用,但导致体内干扰试验结果与预期结果相反的原因仍需进一步验证。
【作者单位】： 石河子大学动物科技学院;内蒙古通辽市农畜产品质量安全中心;
【关键词】： Zfy基因 性别控制 RNAi 精子发生
【基金】：新疆生产建设兵团科技型中小企业技术创新基金项目(2014AB012)
【分类号】：Q78
【正文快照】： Zfy基因是从Y染色体上分离而来,它是在寻找Y染色体上促雄性发育基因时发现的第一个基因,并被认为可能是睾丸决定因子,其编码的蛋白质通过一个“锌指”结构域与DNA结合,从而调控其他基因的表达,在精子的发生过程中发挥着重要作用[1-2]。早期为了验证Zfy基因是最主要的睾丸决定，

本文编号：559537