转G2-EPSPS基因玉米D-3侧翼序列分析与转化体特异性检测方法

发布时间：2017-08-01 14:04

  本文关键词：转G2-EPSPS基因玉米D-3侧翼序列分析与转化体特异性检测方法

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【摘要】：通过一次3'端高效热不对称交互PCR(hiTAIL-PCR)和一次长链PCR扩增方法获得了转抗草甘膦基因(G2-EPSPS)玉米品系D-3的外源DNA插入片段的全DNA序列(T-DNA)及两端侧翼序列,并建立了转化体特异性PCR检测方法。结果显示:T-DNA插入片段全长4 318bp,由一个G2-EPSPS基因的表达盒构成。根据T-DNA 5'、3'端侧翼序列设计引物,建立了转化体特异性检测方法,并分析了该方法的灵敏度以及检出限,研究结果表明,3'端定性PCR检测方法特异性强,灵敏度高,检出极限为每100ng模板量的0.05%。本研究结果对转抗草甘膦外源基因检测和生物安全评价及监管具有重要意义。
【作者单位】： 西南科技大学生命科学与工程学院;中国农业科学院生物技术研究所;四川省农业科学院生物技术核技术研究所;
【关键词】： 转基因玉米 G-EPSPS 侧翼序列 转化体特异性检测
【基金】：转基因重大专项(2014ZX0800301B) 国家自然科学基金(31370126) 国家“973”计划(2013CB733903) 国家“863”计划(2012AA063503)
【分类号】：S513
【正文快照】： 随着转基因技术的飞速发展,转基因作物的种植面积日益扩大,转基因作物的不断商业化使得大量转基因产品进入人们的生活[1-2]。转基因作物专利的保护问题、转基因产品的标识问题、转基因作物潜在的生态安全风险、以及转基因食品安全问题已引起了政府和民众的密切关注,因此当前迫，

本文编号：604581