靶向热休克蛋白-27基因沉默对5-氟尿嘧啶诱导SW480细胞凋亡的影响及机制

发布时间：2017-08-04 22:10

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【摘要】：目的:通过RNA干扰抑制热休克蛋白-27(HSP27)基因的表达,探讨沉默该基因对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导大肠癌SW480细胞凋亡的影响及机制。方法:将细胞分为正常对照组(Normal组)、阴性si RNA转染组(NC组)、HSP27-siRNA转染组(siRNA组)、单纯5-FU组(5-FU组)、5-FU+阴性siRNA转染组(NC+5-FU组)、5-FU+HSP27-siRNA转染组(si RNA+5-FU组),通过脂质体LipofectamineTM 2000将HSP27-siRNA导入SW480细胞,CCK-8法检测靶向HSP27的siRNA和5-FU对SW480细胞增殖的抑制作用,流式细胞技术观察转染后细胞在5-FU作用下的早期凋亡情况,Western blot方法检测凋亡相关蛋白Active-casepase-3、Active-caspase-9及细胞色素C(Cytc)的表达。结果:CCK-8法检测结果显示siRNA+5-FU组细胞增殖抑制率明显高于同期siRNA组和5-FU组,表明联合应用抑制率明显升高(P0.05)。流式细胞仪检测结果表明siRNA组和5-FU组均可诱导SW480细胞凋亡,两者联合应用细胞早期凋亡率明显升高,与Normal组及NC组比较,差异均有统计学意义(均P0.05);Western blot检测结果显示siRNA+5-FU组Active-casepase-3、Active-caspase-9、Cytc蛋白相对表达水平均高于siRNA组和5-FU组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论:靶向HSP27-siRNA能有效抑制大肠癌SW480细胞HSP27蛋白的表达,上调Active-casepase-3、Active-caspase-9、Cytc蛋白的表达,增强5-FU诱导SW480细胞凋亡,逆转肿瘤细胞对5-FU的耐药。
【作者单位】： 温州医科大学附属第二医院肛肠外科;
【关键词】： 结直肠肿瘤 热休克蛋白- RNA干扰 -氟尿嘧啶 细胞凋亡
【分类号】：R735.34
【正文快照】： 2016-05-04近年来,大肠癌发病率和病死率不断攀升,已经严重威胁了人类的健康。对于中晚期患者,指南上推荐以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)为基础的辅助化疗可提高部分患者的生存期,然而肿瘤细胞耐药是化疗失败并导致肿瘤复发的原因之一。目前大量研究表明许多因素可影响5-F

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本文编号：621965