华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析

发布时间：2017-08-19 23:30

  本文关键词：华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析

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【摘要】：【目的】分析华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’的Ring型泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的转基因植株对葡萄白粉病的抗性,研究这2个基因的抗白粉病特性,为改良欧洲葡萄抗病性提供可用基因。【方法】利用同源克隆的方法获得中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的编码区序列(CDS);通过实时荧光定量PCR方法检测其在白粉菌诱导和水杨酸处理后的葡萄叶片中的表达;使用聚乙二醇(PEG)介导法转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位;通过农杆菌介导法获得转基因‘无核白’和‘红地球’植株;经过苯胺蓝染色,利用血球计数板计数分析白粉菌在转基因植株叶片上的生长情况,鉴定转基因株系的抗病性。【结果】中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3响应白粉菌和水杨酸处理,表达模式明显区别于感病对照‘赤霞珠’。中国野生华东葡萄‘白河-35-1’VpUIRP2蛋白定位在细胞质,VpUIRP3蛋白定位无特异性。通过农杆菌介导的遗传转化获得4个VpUIRP2的转基因‘红地球’株系和1个‘无核白’株系,转基因株系对白粉病表现出抗性。【结论】中国野生华东葡萄‘白河-35-1’泛素连接酶基因VpUIRP2能增强葡萄对白粉病的抗性,可以作为抗病基因用于改良欧洲葡萄的抗病性。
【作者单位】： 西北农林科技大学园艺学院;旱区作物逆境生物学国家重点实验室;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室;
【关键词】： 中国野生华东葡萄 泛素连接酶 白粉病 遗传转化 表达分析
【基金】：国家自然科学基金(No.31171924)
【分类号】：S663.1
【正文快照】： 葡萄白粉病(Uncinula necator(Schw.)Burr.)作为世界性真菌病害,严重影响葡萄产量及品质[1]。世界主栽欧洲葡萄(Vitis vinifera L.)品种品质优,但其突出缺点是不抗病[2-4],尤其是不抗葡萄白粉病;生产上常使用化学杀菌剂防治白粉病,但长期使用化学杀菌剂不仅造成病原菌抗药性增

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本文编号：703564