抗草甘膦大豆转基因PCR检测及其饲用安全研究.pdf 全文免费在线阅读

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中国农业大学 博士学位论文 抗草甘膦大豆转基因PCR检测及其饲用安全研究 姓名：朱元招 申请学位级别：博士 专业：动物营养与饲料科学 指导教师：李德发;王凤来 20040601 摘要 本论文研究了RR抗草甘膦转基因大豆、豆粕及其饲料产品中外源基因的PCR检测技术以及 系统评价其饲喂动物的安全性。 建立大豆及其饲料产品中转基因成分的定性和定量PCR检测方法。以CTAB和GMO试制盒 两种方法提取基因组DNA。用常规定性PCR对外源基因盒结构中的不同基因进行筛选或特异性 扩增，对产物进行回收和酶切鉴定，最低检测下限为o．1％：在巢式PCR方法中，对大豆模板DNA 的检测下限可达到pg级水平；利用建立的双引物PCR技术同时检测内源和外源基因，，检出来自 SYBR 美国、阿根廷的大豆及饲料为转基因阳性产品．取得良好效果。另外，建立了双链DNA Green 值分别达到o．9997和0．9992；对已知转基因含量的大豆标准品及大豆模拟样品进行定量，实测值 与实际值相对偏差在5-11％范围之间。上述PCR方法适用于RR大豆或饲料中转基因成分的定性 与定量检测。 通过断奶仔猪生长试验、’生长猪消化试验和大鼠亚慢性毒性试验，评价RR抗草甘膦转基冈 豆粕的饲用价值和安全性。RR大豆 粕 的常规概略养分、氨基酸组成、微量元素、脂肪酸组 成及胰蛋白酶抑制因子等抗营养因子含量在正常范围值内，RR豆粕对断奶仔猪的生产性能和血 生理生化无明显影响。生长猪回肠末

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