三种检测内源性基因修饰方法比较

发布时间：2017-09-01 04:17

  本文关键词：三种检测内源性基因修饰方法比较

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【摘要】：为获得准确的突变信息,除直接测序外,实验初步确定了3种人工核酸酶生物学活性检测方法。利用Surveyor nuclease、T7E1(T7 Endonuclease 1)和HRM(High resolution melt),均以变性退火突变型和野生型DNA序列形成扭曲的双螺旋DNA(distorted duplex DNA)为基础的3种人工核酸酶生物学活性检测方法,确定目标位点是否发生突变。实验成功检测出作用于绵羊MNST基因第一外显子的CRISPR/Cas9和第三外显子的TALEN目标位点发生突变,并对3种检测方法的结果和特点进行了分析比较,得出3种检测方法的优缺点,为实验室分析确定细胞利用非同源末端连接修复DNA双链断裂结果提供参考。
【作者单位】： 新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室;石河子大学动物科技学院;
【关键词】： 基因组编辑 Surveyor核酸酶 T Endonuclease I 高分辨率熔解曲线(HRM)
【基金】：国家自然科学基金项目(31360276) 兵团院士资金专项(2007JC19) 兵团国际合作项目(2013BC004) 新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室项目(2013KLS01) 优质转基因肉羊新品种培育项目(2013ZX08008-003)
【分类号】：Q78
【正文快照】： 基因突变已成为当今生命科学研究的热点之一,其检测方法也随之迅速发展,变性高效液相色谱分析,单链构象异构多态分析技术,毛细管电泳,直接测序,变性梯度凝胶电泳与化学或酶促裂解等突变检测方法中,酶错配切割(Enzyme mismatchcleavage,EMC)方法临床应用简单,具有一定的优越性

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 张建佚;冯洁;杨泽;霍正浩;;高分辨率熔解曲线小扩增子法结合混样法在线粒体13928G>C突变分析中的应用[J];中国医药生物技术;2009年06期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 王s，

本文编号：769836