大豆Pre-miRNAs作为内参基因在盐碱胁迫下的表达稳定性分析

发布时间：2017-09-01 07:39

  本文关键词：大豆Pre-miRNAs作为内参基因在盐碱胁迫下的表达稳定性分析

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【摘要】：【目的】对比大豆Pre-miRNAs候选内参基因和传统内参基因的表达稳定性,筛选出适合盐、碱胁迫条件下RT-qPCR分析的最稳定内参基因。【方法】选用了6个保守的Pre-miRNAs基因和4个常规的内参基因作为候选内参基因,通过RT-qPCR的方法,利用GeNorm和NormFinder软件,评价了10个候选内参基因在大豆盐、碱胁迫条件下的稳定性。【结果】大豆盐胁迫下,叶中表达最稳定的基因组合是Pre-miR166和Pre-miR172,表达最稳定的单一基因是FboX;根中表达最稳定的基因组合是Act11和EF1A,表达最稳定的单一基因是Act11。大豆碱胁迫下,叶中表达最稳定的基因组合是Pre-miR393和Pre-miR172,表达最稳定的单一基因是Pre-miR393;根中表达最稳定的基因组合是Act11和60S,表达最稳定的单一基因是Pre-miR172。【结论】大豆Pre-miRNAs可以与传统内参基因一样作为内参定量目的基因。
【作者单位】： 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;吉林农业大学生命科学学院;东北师范大学附属中学;
【关键词】： 大豆 盐胁迫 碱胁迫 荧光定量PCR Pre-miRNAs(前体miRNAs) 内参基因
【基金】：国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08010-002) 国家自然科学基金项目(31271746,31201144) 吉林省发改委项目(JF2012C002-04)
【分类号】：S565.1
【正文快照】： 荧光定量PCR是一种快捷、准确、强大的定量分析技术,但其结果的可靠性取决于内参基因是否稳定[1-2]。传统内参基因的选择通常选用构成细胞器骨架基本组分或参与生物体内基本代谢过程稳定表达的基因[3-5]。但是,近年来的研究发现,在不同类型的细胞和组织中、发育的不同阶段以及，

本文编号：770808