利用RNA干扰技术沉默稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因

发布时间：2017-09-01 13:03

  本文关键词：利用RNA干扰技术沉默稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因

  更多相关文章： RNA干扰 稻纵卷叶螟 几丁质合成酶A基因 双链RNA

【摘要】：稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)是一种主要的水稻害虫,几丁质合成酶是昆虫体内几丁质合成通路中的一个关键酶,在昆虫生长发育中具有重要作用,是控制害虫的理想靶标。本文采用RNA干扰(RNAi)技术,以稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因(CmCHSA)为靶标,设计两个靶位点CmCHSA-I和CmCHSA-II,在体外分别合成其双链RNA(dsRNA),用显微注射法导入3龄幼虫体内,然后通过表型观察和荧光定量PCR(RT-q PCR)检测干扰效应。结果表明,注射两种dsRNA后纵卷叶螟对水稻的取食明显下降,生长发育阻滞,虫体变小变黑和畸形,有的出现死亡。RT-q PCR表明,注射CmCHSA-I和CmCHSA-II两种dsRNA在96 h后,CmCHSA的表达量相比对照分别下降了59%和64%。注射CmCHSA-I和CmCHSA-II两种dsRNA 7 d后,稻纵卷叶螟的死亡率分别为80%和83.33%,与对照组相比,分别增加了66.67%和70%。本研究用注射法RNAi技术成功实现了对稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因的沉默,为利用该技术研究昆虫基因的功能,以及通过转基因RNAi技术防治稻纵卷叶螟奠定了基础。
【作者单位】： 贵州大学昆虫研究所贵州山地农业病虫害重点实验实;贵州大学昆虫资源开发利用特色重点实验室;
【关键词】： RNA干扰 稻纵卷叶螟 几丁质合成酶A基因 双链RNA
【基金】：国家自然科学基金项目“利用RNAi技术防治稻纵卷叶螟的研究”(31360443) 贵州省科技创新人才团队项目“贵州省节肢动物资源开发利用科技创新人才团队”(黔科合人才团队[2014]4001号)
【分类号】：S435.112.1
【正文快照】： 水稻(Oryza sativa)是人类的一种主要粮食作物,世界上有一半以上的人口以稻米为主食。我国是世界上最大的大米生产国和消费国,有65%以上的人口以大米为主食。因此,水稻高产丰收对我国粮食安全至关重要。然而,虫害则是造成水稻减产的主要原因之一。稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis m

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王高峰;冯欣;彭德良;孙建华;;RNA干扰技术在植物线虫基因功能研究及虫害防治方面的应用[J];生物技术通报;2008年05期

2 ;[J];;年期

，

本文编号：772225