不结球白菜抗坏血酸合成基因BcGME的同源克隆及胁迫下的表达分析

发布时间：2017-09-03 16:12

  本文关键词：不结球白菜抗坏血酸合成基因BcGME的同源克隆及胁迫下的表达分析

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【摘要】：[目的]本文旨在探究逆境下BcGME基因与抗坏血酸(As A)含量的关系,为培育高品质的不结球白菜品种奠定理论基础。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,同源克隆了BcGME基因的全长,应用生物信息学分析了其氨基酸序列,通过实时荧光定量PCR技术测定了BcGME基因在过氧化氢胁迫和水淹胁迫下的表达水平,利用高效液相色谱(HPLC)测定了相应的抗坏血酸含量。[结果]BcGME基因包含一个长度为1 137 bp的开放式阅读框(ORF),编码379个氨基酸。推测其蛋白理论相对分子质量为42.97×103,理论等电点p I值为5.84,分子式为C1907H2949N519O570S22,属于不稳定蛋白。总平均疏水指数为-0.440,属于亲水蛋白。亚细胞定位预测该蛋白分布在细胞质中。BcGME氨基酸序列与十字花科大部分植物的相似性为90%以上,不结球白菜BcGME与十字花科的大白菜、甘蓝型油菜、拟南芥相应蛋白的进化距离较近。过氧化氢胁迫下,As A含量在6 h达到峰值,同时BcGME基因的表达量也达到最高;水淹胁迫下,1 d时As A含量最高为12.99μg·g~(-1),随后As A含量急速下降,1 d时的BcGME基因表达量是0 d的1.5倍。[结论]过氧化氢胁迫和水淹胁迫下,不结球白菜植株中BcGME基因的表达量变化趋势与As A含量变化趋势一致,说明GME可能是不结球白菜抗坏血酸合成途径中的关键调控基因。
【作者单位】： 南京农业大学园艺学院/作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室;
【关键词】： 不结球白菜 BcGME 抗坏血酸 序列分析 非生物胁迫
【基金】：中央高校基本科研业务费自主创新重点研究项目(KYZ201111) 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA100202) 江苏省科技支撑计划项目(BE2012325)
【分类号】：S634.3
【正文快照】： 不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)是我国长江中下游地区的大众蔬菜种类。如何提高不结球白菜的抗坏血酸(L-ascorbic acid,As A)含量,增强其对环境胁迫的耐受力,是近年来不结球白菜育种的目标之一。研究表明,As A在植物体内主要有2个功能:作为酶的辅因子

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本文编号：785999