茎环法对转ZmC1基因丹参毛状根中microRNA表达分析

发布时间：2017-09-03 18:00

  本文关键词：茎环法对转ZmC1基因丹参毛状根中microRNA表达分析

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【摘要】：目的:对转Zm C1基因丹参毛状根C1-3株系中8个microRNAs(miRNAs),即miR164b、miR166a、miR166b、miR171a、miR171b、miR172、miR394和miR397进行表达定量分析。方法:以野生型丹参毛状根为对照,采用茎环法(Stem-loop),针对每个miRNA设计3条引物,包括一条特异性反转录引物、一条上游引物和一条通用反向引物。每个miRNA单独反转录,实时荧光定量PCR(q PCR)检测转基因丹参毛状根C1-3中8个miRNA的表达,实验数据用ΔΔCt法进行分析。结果:与野生型丹参毛状根相比,在转基因毛状根C1-3中8个miRNA均表现为不同程度的上调,其中miR394、miR397和miR164最为显著,分别为对照的15.14倍、7.31倍和4.82倍。结论:茎环法可以成功应用于检测丹参中miRNA的表达;C1-3中这几个miRNA转录水平上调可能与Zm C1异源表达引起的有效成分含量及形态发育表型变化相关。
【作者单位】： 上海中医药大学中药研究所;
【关键词】： 茎环法 转ZmC基因 丹参毛状根 miRNA 表达分析 实时荧光定量PCR
【基金】：上海市教委科研创新重点项目(14ZZ117)
【分类号】：S567.53
【正文快照】： microRNAs(miRNAs)是一类真核细胞中广泛存在的内源性非编码小RNA[1]。成熟miRNA通过与靶基因互补配对引起靶基因的降解或者抑制其翻译来调节靶基因的表达水平,miRNA是基因表达的重要调控分子[2],在植物的生长发育、激素信号转导、应激反应和次生代谢等方面都起着不可替代的调

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本文编号：786472