转基因柑橘外源基因拷贝数的实时荧光定量PCR检测

发布时间：2017-09-05 12:33

  本文关键词：转基因柑橘外源基因拷贝数的实时荧光定量PCR检测

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【摘要】：为分析转基因柑橘中外源基因整合拷贝数,基于实时荧光定量PCR法,建立通用、准确、简便的转基因柑橘外源基因拷贝数检测体系,利用该体系成功检测了150个转基因柑橘单株系外源基因整合拷贝数。结果表明,转基因柑橘中外源基因整合最低拷贝数为1,最高达5个,其中1、2和≥3拷贝的单株数分别占总数的40.0%、18.0%和42.0%;采用Southern blot技术进行检测,结果基本一致,极少数单株经实时荧光定量PCR分析的拷贝数比Southern blot检测的数值高。说明本研究建立的实时荧光定量PCR方法检测转基因柑橘外源基因整合拷贝数更加准确可靠。拷贝数为1~2的转基因株系可作为将来开展转基因目标性状研究及转基因生物安全性评价有利用价值的试验材料。
【作者单位】： 西南大学/中国农业科学院柑桔研究所 国家柑桔工程技术研究中心 国家柑桔品种改良中心;
【关键词】： 柑橘 实时荧光定量PCR 转基因 拷贝数 Southern blot
【基金】：国家自然科学基金项目(31272150) 国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-27) 国家科技支撑计划项目(2012BAD19B06) 重庆市基础与前沿研究计划项目(cstc2015jcyj A80042) 中央高校基本科研业务费专项(XDJK2014C129);中央高校基本科研业务费专项(XDJK2014A018) 重庆市集成示范重点项目(cstc2015jcsf-kjfp80027)
【分类号】：S666
【正文快照】： 随着规模化、实用化转基因柑橘技术的发展,陆续得到了大量各类柑橘的转基因材料。外源功能基因在基因组中的整合分析是转基因柑橘材料进行生物安全性评价中必不可少的研究内容。研究表明,多拷贝外源基因,多数转基因转录后沉默,而单拷贝外源基因很少发生沉默(Tang et al.,2007;

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本文编号：798003