慢病毒介导沉默食管癌细胞53BP1基因表达对裸鼠移植瘤放射敏感性的研究

发布时间：2017-09-05 20:18

  本文关键词：慢病毒介导沉默食管癌细胞53BP1基因表达对裸鼠移植瘤放射敏感性的研究

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【摘要】：背景与目的:p53结合蛋白1(p53 binding protein,53BP1)在多种正常组织和肿瘤细胞中有表达,与放射线照射后细胞周期阻滞有关。体外实验证实抑制53BP1的蛋白表达可有效地消除肿瘤细胞照射后引起的周期阻滞,增加放射敏感性。但体内实验国内尚未见相关报道。该研究旨在探讨沉默食管癌细胞53BP1基因对裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法:将48只BALB/c/nu裸鼠按随机数字表法分为对照组、单纯照射组、空载体组、空载体加照射组、沉默53BP1组以及沉默53BP1加照射组,每组8只,于裸鼠皮下接种相应食管癌细胞ECA109,制备裸鼠模型,给予15 Gy放射线单次照射,受照后1 h每组处死3只裸鼠,将肿瘤标本按蛋白[质]印迹法(Western blot)及流式细胞分析要求处理,Western blot检测移植瘤组织中CHK1、CHK2和磷酸化CHK2-T68的表达,流式细胞术分析裸鼠肿瘤组织中细胞周期分布和细胞凋亡。观察各组剩余裸鼠移植瘤照射后的生长情况,移植瘤体积变化情况。结果:所有接种裸鼠均成活并有肿瘤形成,各组之间肿瘤体积大小差异无统计学意义(F=0.67,P=0.69);单纯照射组和空载体照射组裸鼠的肿瘤生长速度慢于未照射组(P=0.02),沉默53BP1加照射组裸鼠的肿瘤生长速度最慢(P=0.03),沉默53BP1加照射组的相对生长速率较空载体加照射组和单纯照射组降低,生长抑制率增加(P=0.01)。沉默53BP1加照射组的q值为1.45;沉默53BP1加照射组裸鼠体内CHK1和CHK2的蛋白表达产物未见明显变化(P=0.71),CHK2-T68的磷酸化水平较单纯照射组和空载体照射组明显下降(P=0.03),各组裸鼠的瘤组织中细胞周期分布和凋亡率差异无统计学意义(P=0.45)。结论:体内研究显示沉默53BP1基因可以提高食管癌放射敏感性。
【作者单位】： 河北医科大学第四医院放疗三病区;河北医科大学公共卫生学院;
【关键词】： 食管癌 BP 移植瘤 放射敏感性 RNA干扰
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30470524);国家自然科学基金资助项目(30870743);国家自然科学基金资助项目(8157111792) 河北省医学科学研究重点课题计划项目(20100416)
【分类号】：R735.1
【正文快照】： 照射后细胞周期阻滞为受损细胞修复创造了条件,消除照射后G2期阻滞,促使照射后G2期未修复的细胞进入有丝分裂期,可以增加放射敏感性[1]。我们前期研究采用RNA干扰技术抑制食管癌细胞ECA109中细胞周期检测点激酶p53结合蛋白1(p53 binding protein 1,53BP1)的表达后,发现CHK2-p

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本文编号：800055