赤眼鳟Toll样受体3基因cDNA全长克隆及表达分析

发布时间：2017-09-09 09:26

  本文关键词：赤眼鳟Toll样受体3基因cDNA全长克隆及表达分析

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【摘要】：为探究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)Toll样受体3(Toll-like receptor 3,Sc TLR3)基因是否参与抗病毒免疫反应,实验运用RACE技术,克隆得到Sc TLR3基因c DNA全长序列,并进行了生物信息学分析;通过RealTime q PCR技术,检测了Sc TLR3 m RNA在健康赤眼鳟10个组织中的分布以及感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)后肝脏、脾脏、体肾和头肾中的表达特征。结果表明:Sc TLR3基因c DNA序列全长4043 bp,包括5?-非编码区(UTR)216 bp,开放阅读框(ORF)2715 bp和3?-UTR 1112 bp;Sc TLR3共编码904个氨基酸残基,推导的蛋白分子量102.67 k D,理论等电点8.76;SMART结构域预测显示,Sc TLR3由N端的信号肽(SP)、富亮氨酸结构域(LRRs)、跨膜结构域(TM)和C端的Toll/白介素-1受体结构域(TIR)组成。实时荧光定量结果显示,Sc TLR3m RNA在检测的各组织中均有表达,肝脏中的相对表达量极显著高于其他组织(P0.01);感染GCRV后,肝脏、脾脏、体肾和头肾组织中Sc TLR3 m RNA均上调表达,肝脏、脾脏和体肾组织中的相对表达量在24h达到峰值,分别为对照组的5倍、7倍和6倍。研究表明,Sc TLR3具有TLRs家族基因的典型结构特征,并能被GCRV诱导表达,推测其在赤眼鳟抗GCRV入侵免疫反应中发挥了重要作用。
【作者单位】： 湖南农业大学湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心;水产高效健康生产湖南省协同创新中心;湖南农业大学动物医学院;
【关键词】： 赤眼鳟 Toll样受体 分子克隆 表达特征
【基金】：国家自然科学基金面上项目(31272652);国家自然科学基金青年项目(31402289) 湖南农业大学科学基金项目(13YJ04)资助~~
【分类号】：S917.4
【正文快照】： Toll样受体(Toll-like receptor,TLRs)是一类识别病原体保守结构——病原相关分子模式(Pathogenassociated molecular patterns,PAMPs)的模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs)[1,2]。自1985年在果蝇中被发现起,TLRs基因受到广大研究者的关注[3]。鱼类中首个TLRs

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本文编号：819628