耐碱GsCHX19基因的克隆及对苜蓿的遗传转化

发布时间：2017-09-09 11:03

  本文关键词：耐碱GsCHX19基因的克隆及对苜蓿的遗传转化

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【摘要】：基于实验室前期野生大豆G07256碱胁迫转录组数据,结合生物信息学方法筛选得到响应碱胁迫的cation/H+逆向转运蛋白基因Gs CHX19,克隆了Gs CHX19基因全长CDS编码序列并将其构建到p CAMBIA330035Su植物超量表达载体中。以肇东紫花苜蓿为受体材料,通过农杆菌介导法将重组的植物表达载体转化其子叶节,用含0.5mg/L草铵膦的筛选培养基进行筛选,获得20株抗性植株。采用PCR方法检测抗性植株中bar基因的表达,获得16株PCR阳性植株。对获得的PCR阳性植株进行RT-PCR及real-time PCR检测,鉴定共获得11株RT-PCR阳性植株,且证明Gs CHX19基因在各转基因植株中均有不同程度的表达。结果表明,Gs CHX19基因成功转化苜蓿,并且得到表达,该转基因植株将为耐盐碱转基因苜蓿新品种的培育提供重要的试验材料。
【作者单位】： 东北农业大学农业生物功能基因重点实验室;
【关键词】： Cation/H~+逆向转运蛋白 GsCHX 野生大豆 苜蓿 遗传转化
【基金】：国家自然科学基金(31171578) 黑龙江省高校科技创新团队建设计划(2011TD055)
【分类号】：S541.9
【正文快照】： 东北自然环境条件优越,具有广袤的草原,是发展畜牧业的理想基地。然而,由于环境因素与人为因素导致的不断扩大的盐碱地面积严重威胁到了畜牧业的发展。紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是世界上栽培最广泛、利用最早的豆科牧草,具有产量高、品质优良的特点。随着苜蓿产业的发展,，

本文编号：820051