基质重建相关基因MXRA7在小鼠骨髓造血中的作用

发布时间：2017-09-11 19:42

  本文关键词：基质重建相关基因MXRA7在小鼠骨髓造血中的作用

  更多相关文章： MXRA7基因 骨髓 造血 微环境 祖细胞 集落

【摘要】：骨髓微环境对骨髓造血功能有着非常重要的作用,因而探索造血微环境能更加精确的了解参与骨髓造血的调控因素。在骨髓中负责直接造血的细胞有HSC及祖细胞,而其他细胞例如骨髓基质细胞、内皮细胞、成纤维细胞则负责维持造血微环境,负责分泌复杂的造血生长因子、表达粘附分子、分泌蛋白质和多糖构成细胞外基质成分以保证造血的顺利进行。MXRA7基因(Matrix Remodeling Associated 7)就是基质重建相关基因之一。为了探讨MXRA7基因对小鼠骨髓造血功能的影响,本文首先通过体内实验研究了野生型小鼠和MXRA7基因敲除鼠外周血中红细胞、粒细胞、血小板数量的差异。血象五分类检测结果显示MXRA7基因敲除后,小鼠的各系血细胞都有所降低,白细胞和血小板相较红细胞有更明显的降低。通过体内外相结合的方法,研究MXRA7基因敲除小鼠骨髓造血微环境的变化,检测了骨髓造血微环境中相关造血基因(G-CSF, M-CSF, Nestin,IL-1,CXCl12, Angptl3,TPO等)的表达差异。结果显示,造血相关基因表达都有所下调。造成造血功能差异的原因可能是HSC向各系祖细胞的分化能力发生改变。通过集落形成细胞实验(colony-forming cell,CFC)对造血祖细胞的分化进行定性和定量分析,试验收集了WT小鼠和MXRA7基因敲除鼠P2代骨髓间充质干细胞培养液,将之添加到甲基纤维素培养基中制成条件培养基,通过观察集落的增殖情况,检测由于MXRA7缺失而对骨髓中各系祖细胞集落形成的影响,CFU-G、CFU-M、CFU-GM、BFU-E等造血相关细胞的集落形态或数量都有所变化。基因芯片结果也显示,MXRA7基因敲除小鼠和野生型小鼠的骨髓细胞在红细胞发育、凝血以及骨发育等方面存在显著差异。
【关键词】：MXRA7基因 骨髓 造血 微环境 祖细胞 集落
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：Q462
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 第一部分 研究论文 MXRA7基因敲除后对小鼠骨髓造血功能的影响9-46
• 前言9-10
• 1 材料与方法10-17
• 1.1 材料10-11
• 1.2 研究方法11-17
• 2 实验结果17-39
• 2.1 MXRA7基因在骨髓中的表达情况17-18
• 2.2 MXRA7蛋白在骨髓中的表达情况18
• 2.3 MXRA7蛋白在细胞中的表达位置18-19
• 2.4 小鼠BMSC的培养以及增殖能力检测19-22
• 2.5 两种来源BMSC相关基因的表达差异22-23
• 2.6 外周血血象分析23
• 2.7 造血祖细胞集落培养情况23-26
• 2.8 两种小鼠骨髓中巨核细胞的差异26-27
• 2.9 基因芯片分析27-39
• 3 讨论39-42
• 4 结论42-43
• 参考文献43-46
• 第二部分 文献综述 MSC的研究进展46-56
• 1. 间充质细胞的概述46-48
• 1.1 MSC的发现46
• 1.2 不同组织来源MSC的生物学特性46-48
• 2 间充质细胞与造血支持48-51
• 参考文献51-56
• 致谢56

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本文编号：832700