谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究

发布时间：2017-09-15 05:47

  本文关键词：谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究

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【摘要】：【目的】由于谷氏菌素产生菌禾粟链霉菌的遗传操作效率较低,本研究在谷氏菌素生物合成基因簇成功异源表达的基础上,通过在异源宿主天蓝色链霉菌M1146中阻断谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD,研究其在谷氏菌素生物合成中的作用,为谷氏菌素生物合成途径的阐明奠定基础。【方法】以含有谷氏菌素生物合成基因簇的黏粒D6-4H为基础,通过PCR-targeting的方法分别将gouC和gouD敲除得到重组质粒p GOUe-ΔC和p GOUe-ΔD。通过接合转移将这两个重组质粒分别导入天蓝色链霉菌M1146中,获得gouC和gouD的缺失突变株M1146-GOUe-ΔC和M1146-GOUe-ΔD,通过HPLC分析突变株的谷氏菌素中间产物积累情况,分离纯化后对其进行结构鉴定和生物活性检测。【结果】gouC和gouD的缺失均导致谷氏菌素不能合成,突变株发酵液中积累了不同的中间产物,生物活性分析发现这些中间产物均失去了对肿瘤细胞的抑制活性。【结论】gouC和gouD是谷氏菌素生物合成的重要基因,与谷氏菌素肽基部分的肌氨酸残基合成相关。本研究为阐明谷氏菌素的生物合成机制提供了更多的依据。
【作者单位】： 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室;中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室;
【关键词】： 禾粟链霉菌 谷氏菌素 生物合成基因簇 功能研究 产物鉴定
【基金】：国家“973计划”(2015CB150600) 国家自然科学基金(31270110,31571281)~~
【分类号】：Q78
【正文快照】： 谷氏菌素属于核苷肽类抗生素,具有抗肿瘤、抗病毒、抗支原体、驱虫与杀螨等生物活性[1 4],是一种具有开发价值的农用与医用抗生素,其产生菌主要包括谷氏链霉菌(Streptomyces gougerotii)和禾粟链霉菌(Streptomyces graminearus)[5 6]。谷氏菌素是蛋白质合成的抑制剂[7],通过

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2 牛国清;李磊;韦俊宏;江玲娟;谭华荣;;谷氏菌素生物合成及其表达调控[A];中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会论文摘要汇编（2009-2013）[C];2013年

3 韦俊宏;牛国清;谭华荣;;谷氏菌素生物合成调控基因gouR的功能研究[A];2012年第五届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2012年

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本文编号：854682