马蔺VP基因的克隆与植物表达载体构建

发布时间：2017-09-15 14:47

  本文关键词：马蔺VP基因的克隆与植物表达载体构建

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【摘要】：以马蔺幼根总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增得到马蔺H+-PPase全长序列并克隆到p MD19-T载体,命名为Il VP。序列分析表明该基因的开放阅读框为2 316 bp,编码771个氨基酸,推测等电点为5.16,分子量为80.7 k D,所得到的序列与Gen Bank中注册的高等植物液泡膜H+-PPase的核苷酸序列相比,其同源性均达到70%以上,其氨基酸序列的同源性则达到79%以上。用SmaⅠ和SacⅠ分别对目的基因质粒和植物表达载体p BI121进行双酶切,在DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物重组质粒p BI121-35S-Il VP-Nos,再转入根癌农杆菌EHA105中,为该基因在烟草等植物中遗传转化和基因功能研究奠定基础。
【作者单位】： 北京市农林科学院北京草业与环境研究发展中心;山西农业大学;
【关键词】： 马蔺 H+-PPase基因 序列分析 重组质粒 遗传转化
【基金】：北京市自然科学基金项目(6142007;6152008) 北京市农林科学院创新能力建设专项(KJCX20140103)共同资助
【分类号】：Q943.2;S682.19
【正文快照】： *同等贡献作者*通讯作者,menglin9599@sina.comCloning and Construction of Plant Expression Vector of Il VP Gene from IrislacteaGuo Jingya1,2*Li Shanshan1*Guo Qiang1Mao Peichun1Tian Xiaoxia1Meng Lin1**Yang Xiaopen21 Beijing Research and Development Center fo，

本文编号：857159