刺激隐核虫小GTP酶Ran基因的克隆与表达

发布时间：2017-09-15 16:13

本文关键词：刺激隐核虫小GTP酶Ran基因的克隆与表达

【摘要】：对刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)的小GTP酶Ran基因(Ci Ran)进行研究,以期为刺激隐核虫病原生物学研究及其防治提供理论基础。从刺激隐核虫滋养体/包囊前期cDNA文库中筛选出Ci Ran基因的克隆,利用生物信息学方法对CiRan基因及其编码的蛋白进行结构与功能的预测;通过逆转录PCR检测CiRan的mRNA。结果表明其在刺激隐核虫的各个发育阶段均有表达。对CiRan基因开放阅读框内的非通用密码子进行改造,并构建重组质粒p GEX-4T-1/CiRan,将其转化到大肠杆菌(E.coli)后成功表达分子量为51.3 kD的重组融合蛋白rCiRan。用rCiRan蛋白免疫鼠血清进行免疫印迹分析,结果表明,抗rCiRan血清能识别刺激隐核虫各期虫体的天然CiRan蛋白,其表观分子量为25.3 kD,与根据编码基因序列推测出的理论值相符;以rCiRan的抗血清做间接免疫荧光抗体实验,结果表明天然CiRan蛋白在幼虫的细胞质和细胞核内均有分布,且在核膜周围富集,佐证了该分子潜在的功能。
【作者单位】：福建师范大学生命科学学院福建省发育与神经生物学重点实验室;江西省东乡县第一中学;
【关键词】： 刺激隐核虫 小GTP酶Ran 克隆表达分析
【基金】：福建省教育厅JK项目(JK2013008) 福建省自然科学基金项目(2014J01120) 福建省公务员局引进人才科研启动项目(2010-595) 福建省农业重大专项(2013NZ0002-5)
【分类号】：S941.5
【正文快照】： 刺激隐核虫病,俗称“白点病”,其病原为刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)。该虫是隶属于纤毛虫纲的单细胞寄生原虫,可寄生于除莹斑篮子鱼(Siganus oramin)以外的几乎所有海水硬骨鱼类皮肤、鳃和眼上,造成炎症且刺激宿主大量分泌黏液,引起鱼类宿主窒息或继发细菌感染,甚至死

【参考文献】

中国期刊全文数据库前4条

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