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菰黑粉菌MAPK同源基因UeKss1的克隆及表达

发布时间:2017-09-26 02:31

  本文关键词:菰黑粉菌MAPK同源基因UeKss1的克隆及表达


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【摘要】:菰黑粉菌作为茭白植株体内的内生真菌,其二型态转换与茭白孕茭密切相关,而MAPK途径在真菌二型态转换中具有重要调控作用。本研究在菰黑粉菌中克隆得到了一个MAPK基因UeKss1,通过与酵母菌中的MAPK途径蛋白进行聚类分析表明其属于Kss1的同源蛋白。进一步的系统进化分析表明,UeKss1与黑粉菌属真菌的Kss1同源性最高,达80%以上,且它的丝/苏氨酸双特异性蛋白激酶催化结构域高度保守。不同碳源诱导下菰黑粉菌的生长特征及UeKss1表达分析发现,只有蔗糖培养基能诱导菰黑粉菌菌丝形成,而在PDA、葡萄糖和麦芽糖培养基中,该菌都保持酵母型生长;UeKss1基因的表达量在PDA和葡萄糖培养基中变化不显著,但在麦芽糖培养基中,该基因的表达随着培养时间的延长持续上调表达,而在蔗糖培养基中,UeKss1的表达量虽然也呈现上升趋势,但是远小于麦芽糖的诱导表达量。对UeKss1进行的原核表达纯化,经Western blot验证得到纯度较高的UeKss1蛋白。研究结果可为UeKss1基因的功能研究,阐明其在菰黑粉菌二型态转换中的作用机制提供帮助。
【作者单位】: 中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室;
【关键词】菰黑粉菌 UeKss 丝裂原活化蛋白激酶 二型态转换
【基金】:浙江省公益项目(2014C32022) 国家科技支撑计划项目(2012BAD27B01) 国家自然科学基金项目(31201499;31470785)
【分类号】:S645.2
【正文快照】: 菰黑粉菌(Ustilago esculenta)属于黑粉菌纲黑粉菌科黑粉菌属,其寄生茭白植株可促进茎杆基部膨大,形成可以食用的肉质茎。茭白是我国第二大水生蔬菜,是菰黑粉菌目前所知的唯一寄主[1,2]。据报道,茭白膨大茎的形成是菰黑粉菌与茭白植株互相作用的结果[3,4]。在田间茭白有雄茭、

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本文编号:921002

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