百合无症病毒16kD基因的克

发布时间：2017-09-29 18:32

  本文关键词：百合无症病毒16kD基因的克隆、原核表达及抗血清制备

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【摘要】：以感染百合无症病毒(LSV)的百合叶片为试材,克隆LSV16 k D基因,连接到原核表达载体p ET-28a(+)上。将获得的重组质粒p ET-28a(+)+16 k D转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到了高效表达的16 k D蛋白,融合蛋白分子量约为20 k D。融合蛋白经过镍柱纯化后作为抗原免疫注射小鼠,制备得到16 k D蛋白抗血清。Western blot分析显示所制备的抗血清与诱导表达的融合蛋白发生特异性反应;通过ELISA检测和RT-PCR检测百合样品,证实制备的抗血清与LSV侵染的百合叶片发生了相同的特异性反应。结果表明,目的蛋白表达成功,所制备的抗血清具有特异性,可用于LSV的快速检测、免疫组织化学以及16 k D蛋白功能研究。
【作者单位】： 大连理工大学生命科学与技术学院;大连理工大学生命与医药学院;
【关键词】： 百合 百合无症病毒 k D 基因克隆 原核表达 抗血清制备
【基金】：国家自然科学基金项目(31070621)
【分类号】：S432.41
【正文快照】： 百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)为香石竹潜隐病毒属(Carlavirus),是侵染百合科植物的主要病毒之一。LSV自20世纪40年代被发现以来(BrierleySmith,1944),世界各地均有大面积的发生的报道(刘成科等,2005;Kim et al.,2012),成为严重危害百合种球生产和鲜切花品质的世，

本文编号：943618