中华蜜蜂细胞色素CYP9E2基因克隆及其表达分析

发布时间：2017-09-30 02:06

  本文关键词：中华蜜蜂细胞色素CYP9E2基因克隆及其表达分析

  更多相关文章： 中华蜜蜂 工蜂 细胞色素P 基因克隆 基因表达 解毒酶

【摘要】：【目的】克隆中华蜜蜂Apis cerana cerana细胞色素CYP9E2基因的完整编码区序列,分析CYP9E2基因在工蜂体内的表达特征,为研究该基因的生物学功能提供理论基础。【方法】以解剖获得的中华蜜蜂采集蜂中肠组织为材料,提取总RNA。利用RT-PCR技术克隆中华蜜蜂CYP9E2基因的编码区。采用多种生物信息学软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,利用荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR)分析其在中华蜜蜂工蜂成虫期不同阶段(初生蜂、哺育蜂、守卫蜂以及采集蜂)头部和中肠组织中的相对表达量及在饲喂氟氯苯菊酯后工蜂中肠组织中的表达变化。【结果】克隆获得中华蜜蜂CYP9E2基因(命名为Ac CYP9E2)mRNA序列,长度为1 600 bp(Gen Bank登录号:KX394629),编码区长1 494 bp,编码497个氨基酸,其蛋白质分子量为57.026k D,等电点为8.32。系统发育树显示,中华蜜蜂Ac CYP9E2与西方蜜蜂Apis mellifera、小蜜蜂Apis florea CYP9E2基因聚成一支。对中华蜜蜂工蜂成虫期不同阶段头部和中肠组织Ac CYP9E2相对表达量测定发现,该基因在中华蜜蜂工蜂成虫期不同阶段的表达量存在一定差异,其中,采集蜂头部和中肠组织中Ac CYP9E2相对表达量均显著高于初生蜂、哺育蜂以及守卫蜂(P0.05),而且4个阶段工蜂中肠组织中的Ac CYP9E2相对表达量均显著高于其头部(P0.05)。饲喂氟氯苯菊酯后,工蜂中肠组织中Ac CYP9E2的相对表达量显著高于对照组(P0.05)。【结论】推测Ac CYP9E2可能参与了中华蜜蜂机体外源物质的代谢与解毒过程。
【作者单位】： 江西农业大学蜜蜂研究所;
【关键词】： 中华蜜蜂 工蜂 细胞色素P 基因克隆 基因表达 解毒酶
【基金】：国家自然科学基金项目(31360587) 国家蜂产业技术体系资助项目(CARS-45-kxj12)
【分类号】：S891
【正文快照】： 蜜蜂是一种高经济效益和生态效益的社会性昆虫,其从事采集活动时需长期暴露在外界环境中,不可避免会吸收一些植物次生物质以及接触一些农药(靳三省和刁青云,2014)。近几十年来,人们大量使用农药来防治农业虫害与疾病,使蜜蜂在采集过程中很容易接触这些农药,导致蜜蜂中毒事件时

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