利用PMI选择标记进行杨树转基因体系的研究

发布时间：2017-10-01 03:05

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【摘要】：[目的]利用不同于抗生素的PMI为选择标记基因的遗传转化体系,对杨树进行双抗虫基因(Bt和Cp TI)的转基因研究。建立杨树以PMI为安全标记基因的转基因体系,为安全、高效的林木转基因育种研究提供实验依据。[方法]选择已有的转Cp TI抗虫基因(利用Kmr选择标记获得)的美洲黑杨杂种优良无性系南林895杨(Populus×euramericana‘Nanlin895’)为受体材料,对杨树叶片、叶片分化芽、茎段生根的甘露糖敏感性等筛选优化,采用农杆菌介导的方法进行双抗虫基因的研究。[结果]较为适合的杨树叶片筛选培养基为:甘露糖8 g·L~(-1)和蔗糖22 g·L~(-1);叶片分化芽筛选培养基为:甘露糖10 g·L~(-1)和蔗糖20 g·L~(-1);茎段生根筛选培养基:甘露糖8 g·L~(-1)和蔗糖22 g·L~(-1)。在此基础上,获得了转Bt和Cp TI双抗虫基因的植株8株。[结论]初步建立了以PMI为安全标记基因的杨树转基因体系:确定了PMI筛选的最适选择压,成功构建了含PMI选择标记基因的植物抗虫表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化最终获得了转双抗虫基因植株。
【作者单位】： 南京林业大学南方现代林业协同创新中心;无锡市林木种苗管理站;南京晓庄学院生命科学系;
【关键词】： PMI 选择标记 南林杨 转基因体系 抗虫
【基金】：国家科技部“863计划”课题(2013AA102703) 国家国际科技合作专项(2014DFG32440) 江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)
【分类号】：S792.11
【正文快照】： 随着基因工程的不断发展,转基因物种的应用日益增加,转基因物种释放后是否会将基因转移到野生植物中,或是否会破坏自然生态环境,打破原有生物种群的动态平衡。基因工程中普遍使用的选择标记基因是否安全以及转基因物种中的选择标记是否会对环境产生潜在的负面效应。这些问题已

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本文编号：951930