鸡胚胎干细胞诱导为雄性生殖细胞及其转基因鸡的制备.pdf文档全文免费阅读、

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孙敏鸡胚胎于细胞诱导为雄性生殖细胞及转基因鸡的制备 鸡胚胎干细胞诱导为雄性生殖细胞及转基因鸡的制备 导师：李碧春教授冀銎姜教授 攀 IY2IIIIIIIIIIIl2IIIIIl5IIIIIl8LIIIl3IILIIoIIIIIYZZ5bJUb 专业：动物发育与遗传工程 扬州大学动物科学与技术学院，扬州225009 摘 要 生殖干细胞在有性繁殖的生物中肩负着将遗传信息在世代中传递的重要任务，即通过 精卵结合产生新的个体。生殖细胞的种系传递特性使得它成为动物胚胎学、发育生物学和 细胞生物学等学科关注的研究对象之一。生殖细胞的可塑性使其能代替胚胎干细胞 stem cell，ESC 用于治疗和遗传修饰，而不涉及伦理和免疫排斥问题，故引 Embryonic 起生物学界极大关注。因此，，如何迅速开展诱导来源于其他组织的干细胞分化成为雄性生 殖细胞的研究显得很有必要和迫切。目前将ES细胞诱导为生殖细胞的研究已经开展，但 诱导方法较多，效率较低。 相对于人、鼠的ES细胞，使用鸡胚ES细胞可以克服伦理方面的限制，且取材方便， 模拟临床治疗实验具有十分明显优势。因此本研究以家鸡做为实验动物模型，在比较ES 和SSCs异同点的基础上，筛选适宜视黄酸 RA 浓度，比较不同基质蛋白、支持细胞、不 同时期睾丸提取液和睾丸细胞条件培养液诱导ES向雄性生殖细胞方向分化的效果，为建 立适宜的诱导体系和后来的临床研究提供参考。同时将诱变后有抗病毒活性的MMx蛋白 通过SSCs体内介导法制备抗病转基因鸡，为制备转基因动物和培育新品种提供新的途径 和思路。研究结果如下： 1 采用免疫荧光和碱性磷酸酶联合检测法鉴定鸡Es细胞和SSCs细胞的干细胞特 B1、 Q6、integrin blot B1、Sox2蛋白在两细胞 检测TRA-1-60、TRA．1．81、C―kit、DAZL、in

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