海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克

发布时间：2017-10-06 03:09

  本文关键词：海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆、高效表达及酶学特性分析

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【摘要】：在许多渗透调节剂中,甜菜碱是最理想的有机小分子渗透调节物质。甜菜碱在植物体内大量积累不会带来危害,同时能提高植物对环境胁迫的抗性。将海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到表达载体p ET-28a(+)上,获得重组载体p ET-Sp BADH并将其成功地转化到BL21(DE3)中得到重组工程菌,经IPTG诱导能高效表达55 k D目的蛋白,表达量可以达到301μg m L 1。酶学特征分析表明,该蛋白最适p H值为7.2,在偏碱条件下能维持较高的催化活性;Sp BADH蛋白对高温敏感,且温度对催化活性影响较大,超过55℃时酶活性只有20%,最适酶催化活性温度为37℃;而有机小分子醇类对酶的催化活性有保护作用,可以通过自身特征维持酶催化活性的微环境。
【作者单位】： 贵州省油菜研究所;贵州禾睦福种子有限公司;贵州省亚热带作物研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;
【关键词】： 海马齿 甜菜碱醛脱氢酶 原核表达 酶活测定
【基金】：国家农业科技成果转化资金项目(2014GB2F200240) 国家科技支撑计划项目(2014BAD01B07) 贵州省农业科学院自主创新专项[(2014)014];贵州省农业科学院专项[黔农科院院专项(2015)16];贵州省农业科学院人才团队项目[黔农科合CR合字(2014)64]资助 贵州省科研机构服务企业行动计划项目黔科合服企[(2015)4001] 贵州省科技厅重大专项[黔科合重大专项字(2013)6005];贵州省科技厅‘百层次’人才项目[黔科合人才(2015)4018]~~
【分类号】：Q943.2;Q946.5
【正文快照】： 低温、高温、高盐和干旱等环境胁迫是限制植物生长和分布的主要因素之一。植物在应答环境胁迫时,甜菜碱是无毒害快速增加的渗透调节物质。同时在细菌、真细菌和动植物中,甜菜碱是许多组织生理缺水时的重要渗透调节物质[1-3]。在植物体内,甜菜碱以胆碱为底物,经两步催化合成,即

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本文编号：980370