幽门螺杆菌lpp20基因在食品级乳酸菌中的表达及免疫活性鉴定

发布时间：2017-10-06 08:17

  本文关键词：幽门螺杆菌lpp20基因在食品级乳酸菌中的表达及免疫活性鉴定

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【摘要】：目的:构建分泌表达幽门螺杆菌lpp20基因的重组乳酸乳球菌菌株,并鉴定其免疫活性,为研究安全高效的幽门螺杆菌口服疫苗奠定基础。方法:采用PCR法从幽门螺杆菌基因组DNA中扩增lpp20基因,将lpp20先与T载体(p MD19-T)连接,进而经双酶切与表达载体p NZ8149-SPusp45连接,用电穿孔法将重组质粒转入食品级乳酸乳球菌菌株NZ3900中,并用Nisin诱导Lpp20表达,表达产物通过Western blot法鉴定免疫活性。结果:lpp20基因的PCR扩增产物大小约为540 bp,重组质粒的酶切、PCR和测序鉴定结果符合预期;在菌体和培养基中均检出表达的Lpp20蛋白,重组表达的Lpp20蛋白相对分子质量约为20 000,且具有与小鼠抗幽门螺杆菌血清反应的免疫活性。结论:成功构建了能够分泌表达幽门螺杆菌Lpp20抗原的乳酸乳球菌菌株,该重组菌株在口服疫苗研究中具有应用潜力。
【作者单位】： 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室;河南省分子医学重点实验室;
【关键词】： 乳酸菌 lpp基因 幽门螺杆菌 分泌表达 食品级
【基金】：中国博士后科学基金资助项目20070410252
【分类号】：R392
【正文快照】： #通信作者:张荣光,男,1968年5月生,博士,副教授,研究方向:分子流行病学,E-mail:zrg@zzu.edu.cn;段广才,男,1958年8月生,博士,教授,研究方向:分子流行病学,E-mail:gcduan@zzu.edu.cn幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是人体胃炎、消化性溃疡和胃癌等胃部疾病的主要病原

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1 张荣光,段广才,范清堂;利用生物信息学分析幽门螺杆菌Lpp20蛋的化学和免疫学分子特征[J];河南预防医学杂志;2003年04期

2 宁云山;李妍;罗军;董文其;李明;;幽门螺杆菌Lpp20抗原的原核表达及其临床应用[J];广东医学;2007年08期

3 ;[J];;年期

，

本文编号：981711