四种芽孢杆菌对蒜薹灰葡萄孢霉抑制作用的时效性研究

发布时间：2019-07-27 09:19

【摘要】：旨在对保存的4种芽孢杆菌菌株种属水平做初步鉴定并研究其在离体条件下对蒜薹灰葡萄孢霉的抑制作用以及活体条件下对蒜薹保鲜的时效性。采用平板对峙法和菌丝生长法进行离体实验,采用有伤接种法在不同时间段进行预防和治疗活体实验。结果表明,离体条件下,与对照相比,4种芽孢杆菌对灰葡萄孢霉菌落扩展和菌丝体生长都有显著的抑制作用且效果HB-2B579B1B001(P0.05)。20℃活体实验中,4种芽孢杆菌的预防处理均能较好地控制蒜薹灰葡萄孢霉病斑扩展,且效果好于治疗处理,但是不同芽孢杆菌最佳的预防时间有所不同。其中,HB-2和B579预防处理能较好地保持蒜薹的可溶性固形物、维生素C以及可滴定酸含量。综合来说,芽孢杆菌HB-2比其他3种芽孢杆菌能更有效地预防蒜薹灰霉病。
【图文】：

（图2）。菌株B579与Bacillussubtilis（EU221345.1）和Bacillussubtilis（EU221334.1）的亲缘关系最近，可初步鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）；菌株B001与Bacillussubtilis（KC121041.1）和Bacillussubtilis（KM365462.1）的进化距离最接近，可鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）。菌株HB-2与Bacillusamyloliquefaciens（JF899255.1）的相似性最高，初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus2000bp1000750500250M12341：B001；2：B1；3：HB-2；4：B579；M：DNAMarker图1四种芽孢杆菌的16SrDNA基因扩增产物电泳图谱

四种芽孢杆菌对蒜薹灰葡萄孢霉抑制作用的时效性研究

2017,33(6)115魏倩等：四种芽孢杆菌对蒜薹灰葡萄孢霉抑制作用的时效性研究amyloliquefaciens）；B1与Bacillusamyloliquefaciens（JF412546.1）和Bacillusamyloliquefaciens（KJ12371-5.1）最相近，鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）。2.2四种芽孢杆菌对灰葡萄孢霉病原菌菌落扩展的抑制作用离体实验结果表明4种芽孢杆菌对灰葡萄孢霉病原菌菌落扩展均具有抑制作用（图3）。4种芽孢杆菌都是滴加活菌液的滤纸片周围产生明显的透明抑菌圈，而滴加过滤液、热处理液和无菌水的滤纸片周围均没有观察到抑菌圈的产生。同时，通过对平板上灰葡萄孢霉的生长形态观察发现，靠近抑菌圈边缘的病原菌菌丝都出现不同程度的被抑制现象，表现如下：菌丝向上生长且扭曲成结，菌丝变粗，颜色变深变暗。而对照菌落表现为菌落边缘生长比较规整，平铺生长，菌丝在平板上分布均匀，无缠绕现象。4种芽孢杆菌对灰葡萄孢霉抑菌圈直径的影响，见表1。芽孢杆菌B001、B1、HB-2、B579周围形成的抑菌圈的直径分别为8.967mm、16.167mm、31.033mm、23.433mm，抑菌圈直径越大，说明芽孢杆菌对灰葡萄孢霉的抑制效果越明显。通过图2基于16SrDNA的系统发育树HB-2B579CKB001B112431243124312431：20μL芽孢杆菌菌液；2：20μL过滤液；3：20μL热处理液；4：20μL无菌水.图3四种芽孢杆菌对灰葡萄孢霉病原菌菌落扩展的抑制效果
【作者单位】：南开大学生命科学学院;国家农产品保鲜工程技术研究中心天津市农产品采后生理与贮藏保鲜重点实验室;
【基金】：国家科技支撑项目(2015BAD16B07) 河南省科技开发合作计划项目(152106000060)
【分类号】：S436.33;S476.1

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