方竹林外生菌根真菌资源调查及其菌剂制备

发布时间：2020-06-07 11:50

【摘要】：外生菌根真菌是一种专性活体营养型真菌,与植物根系形成的共生体,能够促进植物生长,提高养分的吸收,稳定生态系统。本论文采集金佛山方竹和合江方竹天然林地大型真菌,并应用形态学和分子生物学方法鉴定外生菌根真菌的主要种类,对外生菌根真菌进行分离以及纯化培养,固体发酵法进行菌剂的制备。实验结果如下:1、在贵州省正安县新州镇金佛山方竹天然林地和赤水县大同镇合江方竹天然林采集到34种大型真菌,确定外生菌根真菌8科10属19种,含粉褶菌科(Entolomataceae)2种,马勃菌科(Lycoperdaceae)2种,蜡伞科(Hygrophoraceae)4种,红菇科(Russulaceae)7种,乳牛肝菌科(Suillaceae)1种,鸡油菌科(Cantharellaceae)1种,白蘑科(Tricholomataceae)1种,鹅膏科(Amanitaceae)1种。2、对19种外生菌根真菌,对rDNA的ITS区段序列扩增,测序后进行系统发育分析,确定其中5种外生菌根真菌形态与分子鉴定一致,分别为黄方孢粉褶菌Entoloma murrayi、橙黄乳菇Lactarius aurantiacus、红菇Russula lepida、乳牛肝菌Suillus bovinus、红汁乳菇Lactarius hatsudake。3、对外生菌根真菌子实体进行分离与纯化,获得红菇(Russula lepida)和橙黄乳菇(Lactarius aurantiacus)纯菌丝体菌株。4、研究了不同固体培养基对红菇菌丝体生长的影响,筛选出适宜培养基配方为:木屑45%,棉籽壳45%,麦麸8%,1%蔗糖,1%石膏;制备了可用于生产的接种用菌剂。
【图文】：

外生菌根真菌,凝胶电泳,DNA提取,红汁乳菇

图 3.1 外生菌根真菌 DNA 提取凝胶电泳结果1.黄方孢粉褶菌；2.橙黄乳菇；3.红菇；4 乳牛肝菌；5.红汁乳菇Fig3.1 Ectomycorrhizal fungi DNAextraction gel electrophoresis results:1.Entoloma murrayi； 2.Lactarius aurantiacus； 3.Russula rosea； 4.Suillus bovinus；5.Lac序结果种真菌 ITS 区段的 DNA 序列测序结果如下:CGAAGGGTATCTACTGATTTGAGGTCAATAAGTCAAGTGTCTTTGCAATTAGAAGCAAAGACAATGTTATCTGGTTCCAATAGTATAGATTATACCATTGATAATCAGTAATGACTCTGCTAATATTTTTGAAGAGATGTTTTAAAACTTAGCAACTCTCAATTATCCAGTCTTTATAAATTTAAAAATCATAAAGATTGAAAATTTCATGACACTCAAACAGGCATAGAATACCAAGAAGTGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGAT

序列,外生菌根真菌,系统发育树,分类群

贵州大学 2018 届硕士研究生学位论文ACTTTTGTGTCAAAAAGTCAGCGACAGCCCTCACACGCCTCACACACGTTGTACGATAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAG3.2.3 系统发育分析将测序所得的序列运用 GenBank 的序列局部相似性查询系统，在 GenBank数据库下载与所测 DNA 序列相似的序列，通过所用的序列建立系统发育树分析，可以明显的看出分为 4 个聚类群，，其中 79，M10 在分类群 Lactarius，M2 在分类群 Russula，M3 在分类群 Suillus，6 在分类群 Entoloma。并且这 5 种外生菌根真菌的分子鉴定与形态鉴定一致，分别为 6-黄方孢粉褶菌 Entoloma murrayi、79-橙黄乳菇 Lactarius aurantiacus、M2-红菇 Russula lepida、M3-乳牛肝菌 Suillusbovinus、M10-红汁乳菇 Lactarius hatsudake（见图 3.2）。
【学位授予单位】：贵州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S714.3

【参考文献】