盐胁迫下表油菜素内酯对沟叶结缕草愈伤组织生长和再生影响的研究

发布时间：2020-08-28 06:35

【摘要】：土壤盐渍化是当代面临的主要生态问题之一,采用耐盐植物进行盐碱土壤改良成为研究的重点方向之一。沟叶结缕草(Zoysiamatrella(L.)Merr.)生长力强,观赏性好,整体品质优良,广泛栽种于我国南方地区。因具有较好的耐盐性,沟叶结缕草也是盐碱地改良种植中的优良植物选择。但由于其耐盐能力的局限性,尚无法适应高盐盐碱地环境,影响了其在实际应用中的广泛性。因盐碱土壤成分中93.94%为钠离子和氯离子,本试验采用了 NaCl处理模拟盐碱地生长环境,通过使用不同盐浓度进行处理,探究沟叶结缕草愈伤组织及再生植株的耐盐能力,在盐胁迫设置基础上,添加不同浓度梯度表油菜素内酯(EBL),探究其对沟叶结缕草愈伤组织及再生植株耐盐能力的作用效果,尝试以此获得其最佳处理浓度。通过本试验,欲得到增强沟叶结缕草耐盐能力的新思路。试验中经过一系列盐浓度及EBL浓度处理,通过测定及分析各处理下愈伤组织及再生植株形态和生理指标变化,得出沟叶结缕草耐盐能力的范围及EBL对沟叶结缕草耐盐性的具体影响效果。主要研究结果如下:(1)沟叶结缕草愈伤组织具有一定耐盐性,且不同盐浓度处理对其生长和再生影响不同。随着盐浓度的升高,愈伤组织及再生植株的生长态势先升高后降低。低盐浓度下,愈伤组织能够正常的生长和再生,甚至形态指标出现优于对照的情况。当盐浓度≥0.6%时,愈伤组织的生长明显受限;当盐浓度≥0.4%时,愈伤组织的再生明显受限。愈伤组织的生长和再生耐盐能力有所不同,再生时耐盐能力较低。从生理指标上分析,随着盐浓度的升高,愈伤组织和再生植株叶片中保护酶活性不断升高,在高盐浓度下,部分保护酶活性出现下降现象;MDA含量随着盐浓度的升高逐渐升高。在盐胁迫环境下,沟叶结缕草愈伤组织及再生植株体内具有良好的耐盐保护机制,但在高盐浓度下会逐步丧失。(2)适当浓度的EBL可显著提高沟叶结缕草愈伤组织的耐盐性,且促进效果随EBL浓度的升高而增强。在不同盐浓度胁迫下,从外观形态分析,当使用浓度为0.05mg.L-1EBL时,愈伤组织的直径增长率和鲜重增长率最高;使用0.02mg·L-1EBL时,愈伤组织再生植株根长≥5mm外植体块数、出苗数、出芽总数以及再生率最高。从生理指标上分析,当使用浓度为0.05mg.L-1EBL时,愈伤组织的CAT、POD、SOD活性最强,MDA含量最低;使用0.02mg·L-1EBL时,愈伤组织再生植株的CAT、POD、SOD活性最强,MDA含量最低。即0.05mg·L-1为EBL提高愈伤组织耐盐能力的最佳处理浓度,0.02mg·L-1为EBL提高愈伤组织再生耐盐能力的最佳处理浓度。(3)高浓度EBL处理对盐胁迫下沟叶结缕草愈伤组织的生长和再生起抑制作用。盐胁迫下,随着EBL浓度升高,愈伤组织的生长和再生状况开始下降。当EBL浓度0.1mg.L-1时,愈伤组织的生长态势逐渐下降并低于对照,保护酶活性下降,MDA含量上升;当EBL浓度≥0.05mg.L-1时,愈伤组织再生的生长态势逐渐下降并低于对照,保护酶活性下降,MDA含量上升。随着EBL浓度的升高,其对沟叶结缕草愈伤组织耐盐性的提高作用逐渐丧失,甚至出现抑制效果。(4)EBL对提高沟叶结缕草耐盐性具有实际意义。试验中EBL对沟叶结缕草愈伤组织及再生植株中的保护酶系统具有显著促进作用,而保护酶作为耐盐植物抗逆的主要生理机制之一,对植物的耐盐能力有着重要影响。本试验达到了获得耐盐性更强的沟叶结缕草植株这一目的,同时为外施EBL提高沟叶结缕草植株耐盐能力提供启发和借鉴,为沟叶结缕草更广泛地应用于盐碱地改良提供基础依据。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S156.4;S688.4
【图文】：

沟叶结缕草,草坪,外观

浙江大学硕士学位论文绪沟叶结缕草（Ｌ．）邋Ｍｅｒｒ．）是禾本科结缕草属植物。其外观整齐致叶片细长、草层密集，且绿期较长，是高质量的暖季型草坪草种［３４］，在我国南方地区被泛种植使用该草种植所形成的草坪低矮平整，加之茎叶较为纤细，给人以视觉上的致感和美感。沟叶结缕草侵占性极强，易形成大规模的齐整草皮，且具有一定的弹性，优选草坪草种之一（图Ｕ）。逡逑

沟叶结缕草,离体保存,愈伤组织,体细胞无性系变异

Ｆｉｇｌ邋．２邋Ｃａｌｌｕｓ邋ｏｆ邋Ｚｏｙｓｉａ邋ｍａｔｒｅｌｌａ邋ｉｎ邋ｖｉｔｒｏ邋ｆｏｒ邋１１邋ｙｅａｒｓ邋ｏｆ邋ｏｕｒ邋ｌａｂｏｒａｔｏｒ因、体细胞无性系变异进行育种时，关键要有高效且稳的建立经历了漫长的尝试和发展，早在１９７３年，八１＾１＃８］体来进行组织培养，随后成功地诱导出愈伤组织，直到系相继建立并完善。在沟叶结缕草愈伤姐织的诱导方人通过利用沟叶结缕草茎尖诱导的丛生芽以及幼花序和培养后获得植株；本实验室自上世纪末开始，通过结缕出可高效再生的愈伤组织（图１．２），且一直以来都致存、愈伤组织的继代培养以及再生过程中的体细胞无性年探索试验，己形成沟叶结缕草愈伤组织诱导及再生的变异的研究中取得阶段性成果，具体包括利用结缕草逡逑‘Ｚｅｎｉｔｈ’种子诱导出愈伤组织，进行多代盐胁迫处理，体细胞无性系变异植株［４Ｇ］；对沟叶结缕草愈伤组织进行

盐浓度

生能力越强。由于四次测定的外观指标呈现统一趋势，所以试验以最后一次数据统计为标逡逑准，进行耐盐能力比较分析。逡逑从试验结果（图２．２）可知，在盐胁迫处理下，沟叶结缕草愈伤组织的再生状况明显逡逑受到影响。通过比较分析发现，当盐浓度为０．２％时，愈伤组织根长之５ｍｍ的外植体数目和逡逑对照相同为６．００块，成苗的外植体数达到最大值７．３０块，出芽总数达到最大值６７．７０个，逡逑而再生率也徸到最大值４５．６３％。当盐浓度为０．４％时，各项指标出现明显下降趋势，且随逡逑着盐浓度的不断升高

【参考文献】