拮抗菌株NJ13产鞭毛蛋白的分离纯化与原核表达
发布时间：2020-12-24 00:07
本实验室从人参内生菌中分离得到一株甲基营养型芽孢杆菌NJ13（Bacillus methylotrophicus）,研究发现其发酵液在20%饱和度硫酸铵沉淀下的粗蛋白对于人参锈腐菌（Cylindrocarpon destructans）抑制作用显著。经Sephadex G-25脱盐,分离出2个抗菌活性峰,选择2F进行后续实验。稳定性研究发现抗菌粗蛋白2F对紫外稳定,但用氯仿和蛋白酶K处理后活性完全损失。在pH 12条件下抗菌活性损失一半,100℃和121℃条件下完全损失抗菌活性。再经DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换层析,Superdex75 10/300 GL凝胶过滤层析,得到纯度较高的抗菌蛋白2-1-1F,浓缩并稀释后测得抗菌蛋白浓度为0.1026mg/mL,SDS-PAGE结果显示在29KDa左右有单一条带。经质谱鉴定,抗菌蛋白氨基酸序列与贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）UCMB5033鞭毛蛋白FlgG（登录号:CDG29557.1）氨基酸序列覆盖度达到了76%,等电点为4.97,分子量为27KDa,与凝胶中表观分子量几乎一致,初...
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
粗蛋白经SephadexG-25脱盐结果
14图 1.2 洗脱峰抗菌效果Fig.1.2 Antifungal effect of eluting peak性蛋白的稳定性研究结果：2F峰进行稳定性研究，结果表明，2F抗菌蛋全损失抗菌活性（图 1.3）。2F 抗菌蛋白能耐下活性损失较大（图 1.4）。不耐有机溶剂和紫外照射条件下稳定（图 1.5）。
图 1.3 抗菌粗蛋白 2F 的温度稳定性Fig.1.3 Temperature stability of antifungal crude protein 2F图 1.4 抗菌粗蛋白 2F 的酸碱稳定性Fig.1.4 Acid-base stability of antifungal crude protein 2F
本文编号：2934591
【文章来源】：吉林农业大学吉林省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
粗蛋白经SephadexG-25脱盐结果
14图 1.2 洗脱峰抗菌效果Fig.1.2 Antifungal effect of eluting peak性蛋白的稳定性研究结果：2F峰进行稳定性研究，结果表明，2F抗菌蛋全损失抗菌活性（图 1.3）。2F 抗菌蛋白能耐下活性损失较大（图 1.4）。不耐有机溶剂和紫外照射条件下稳定（图 1.5）。
图 1.3 抗菌粗蛋白 2F 的温度稳定性Fig.1.3 Temperature stability of antifungal crude protein 2F图 1.4 抗菌粗蛋白 2F 的酸碱稳定性Fig.1.4 Acid-base stability of antifungal crude protein 2F
本文编号：2934591
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/nykj/2934591.html
