2型猪链球菌Al-2合成酶LuxS的功能鉴定及其在毒力中的作用
发布时间：2020-12-08 19:48
2型猪链球菌（Streptococcus suis serotype2, SS2）是一种重要的人畜共患病病原体,不仅可感染猪导致脑膜炎、肺炎、关节炎、败血症等,甚至可以致急性死亡，每年给全球养猪业造成重大经济损失；偶尔也可通过伤口、呼吸道等途径感染人，患者临床表现为脑膜炎、败血症等疾病，但多为散发，预后较好。值得关注的是我国在1998和2005年分别暴发两起SS2同时大规模感染猪和人的公共卫生事件，而且有大约1/3的病人出现中毒性休克综合征（TSS）的临床表现，这类病人病情发展快，病程凶险，病死率高达62.7%81.3%。我们课题组对于这一情况进行了全面研究，国内外首次报道SS2感染引起新的临床病型——链球菌中毒性休克综合征（streptococcal toxic shock syndrome,STSS），认为SS2的感染宿主范围和致病性都发生重大变化，流行菌株可能发生毒力变异，文章发表后引起国内外学术界的广泛关注。随后，我们对两次流行的代表菌株98HAH12和05ZYH33进行了全基因组测序和组功能注释，结果发现引发两次大流行的SS2强毒株基因组中均带有一段89...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
可知，05ZYH33中的LuxS与无乳链球菌中的相应蛋白
图 1.3 luxS 基因的原核表达A：pET32a- luxS 重组质粒的鉴定结果 (1 重组质粒的 PCR 鉴定；2 从基因组 PCR 扩增该片3 BamHI/ EcoRI 双酶切鉴定重组质粒；4 未酶切重组质粒；M:1KbMarker)B：SDS-PAGE 检测 luxs 重组蛋白的表达(M 预染蛋白 Marker；1.诱导的 pET32a 质粒菌 .；2G 诱导后的 pET32a- luxS 转化菌)4．讨论LuxS 蛋白家族是广泛存在于革兰阳性和阴性菌中的一种保守蛋白，其中既有致病、条件机会致病菌也有共生细菌。我们已经知道 LuxS 蛋白既可能在 AI-2 介导 QS调节细菌多种功能，又同时也是维持代谢平衡的重要代谢酶。鉴于其在细菌中的重作用，其基因特征、结构、功能等方面的研究引起各国学者的广泛关注。近些年，有超过 80 种细菌中报道存在 luxS 同源物，至少有 5 种细菌(幽门螺旋杆菌，嗜血流菌,耐辐射球菌，精细芽孢杆菌和变形链球菌)中的 LuxS 蛋白获得了晶体结构并进行
第三军医大学博士学位论文载体的构建05ZYH33的基因组DNA为模板，用引物对LA段LA (1,068 bp)，用引物对RA1/RA2 扩增得到时用引物对Spc1/Spc2 从pSET2 质粒中扩增得R 产物的电泳结果如图 2.1 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪链球菌2型唾液酸合成酶neu B基因敲除突变株的构建及其生物学特性[J]. 董瑞萍,王长军,程功,李明,王晶,潘秀珍,唐家琪. 微生物学通报. 2009(02)
[2]环境条件对猪链球菌2型电转化效率的影响[J]. 李明,胡福泉,王长军,郑峰,董亚青,潘秀珍,唐家琪. 中国人兽共患病学报. 2007(08)
[3]ΔLuxS的表型分析及其在GBS毒力调控机制研究中的应用[J]. 欧阳谦,马文丽,刘翠华,石嵘,郑文岭. 南方医科大学学报. 2006(01)
[4]微生物嗜铁素介导的铁摄取[J]. 王伟,肖明. 生物学杂志. 2005(04)
[5]一起猪链球菌病暴发流行的流行病学及病原学研究[J]. 朱进,唐家琪,郭恒彬,张云,陶开华. 解放军预防医学杂志. 2000(04)
本文编号：2905590
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：136 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
可知，05ZYH33中的LuxS与无乳链球菌中的相应蛋白
图 1.3 luxS 基因的原核表达A：pET32a- luxS 重组质粒的鉴定结果 (1 重组质粒的 PCR 鉴定；2 从基因组 PCR 扩增该片3 BamHI/ EcoRI 双酶切鉴定重组质粒；4 未酶切重组质粒；M:1KbMarker)B：SDS-PAGE 检测 luxs 重组蛋白的表达(M 预染蛋白 Marker；1.诱导的 pET32a 质粒菌 .；2G 诱导后的 pET32a- luxS 转化菌)4．讨论LuxS 蛋白家族是广泛存在于革兰阳性和阴性菌中的一种保守蛋白，其中既有致病、条件机会致病菌也有共生细菌。我们已经知道 LuxS 蛋白既可能在 AI-2 介导 QS调节细菌多种功能，又同时也是维持代谢平衡的重要代谢酶。鉴于其在细菌中的重作用，其基因特征、结构、功能等方面的研究引起各国学者的广泛关注。近些年，有超过 80 种细菌中报道存在 luxS 同源物，至少有 5 种细菌(幽门螺旋杆菌，嗜血流菌,耐辐射球菌，精细芽孢杆菌和变形链球菌)中的 LuxS 蛋白获得了晶体结构并进行
第三军医大学博士学位论文载体的构建05ZYH33的基因组DNA为模板，用引物对LA段LA (1,068 bp)，用引物对RA1/RA2 扩增得到时用引物对Spc1/Spc2 从pSET2 质粒中扩增得R 产物的电泳结果如图 2.1 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪链球菌2型唾液酸合成酶neu B基因敲除突变株的构建及其生物学特性[J]. 董瑞萍,王长军,程功,李明,王晶,潘秀珍,唐家琪. 微生物学通报. 2009(02)
[2]环境条件对猪链球菌2型电转化效率的影响[J]. 李明,胡福泉,王长军,郑峰,董亚青,潘秀珍,唐家琪. 中国人兽共患病学报. 2007(08)
[3]ΔLuxS的表型分析及其在GBS毒力调控机制研究中的应用[J]. 欧阳谦,马文丽,刘翠华,石嵘,郑文岭. 南方医科大学学报. 2006(01)
[4]微生物嗜铁素介导的铁摄取[J]. 王伟,肖明. 生物学杂志. 2005(04)
[5]一起猪链球菌病暴发流行的流行病学及病原学研究[J]. 朱进,唐家琪,郭恒彬,张云,陶开华. 解放军预防医学杂志. 2000(04)
本文编号：2905590
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