奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌AI-2信号分子检测

发布时间：2022-11-06 10:29

　　为了探索奶牛隐性乳房炎大肠杆菌不同生长时期及不同培养条件下,AI-2信号分子的产生与lux S和pfs转录水平间的相互关系。应用哈维弧菌BB170,检测奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌不同分离株、不同生长期及不同培养条件下AI-2的活性,应用实时荧光定量PCR检测其AI-2产生水平与lux S基因与pfs基因转录的相关性。结果表明,E285、E80814、W41、E30707和EA701205株均能产生AI-2分子,但产生的AI-2均低于阳性菌BB152; E285在迟缓期、对数前期基本没有AI-2的表达,从对数中期开始AI-2开始大量表达,到对数后期达到顶峰,是阴性对照的12倍,随后下降,到稳定期已下降为阴性对照的3. 6倍。当培养基中添加蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、甘露醇、Na Cl及乳糖时,AI-2的活性均明显提高。实时荧光定量PCR结果显示,E285在不同生长期和不同培养条件时,其AI-2活性的高低与lux S基因转录水平一致,但与pfs基因的转录没有明显关系。提示奶牛隐性乳房炎致病性大肠杆菌分离株均能产生AI-2分子,其AI-2活性与lux S基因转录水平具有高度的相关性,与pfs基因... 

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 菌种
    1.2 主要试剂
    1.3 方法
        1.3.1 奶牛隐性乳房炎中大肠杆菌信号分子AI-2的制备
        1.3.2 哈维弧菌BB170的培养
        1.3.4 检测奶牛隐性乳房炎的大肠杆菌不同生长时期AI-2的表达
        1.3.5 不同培养条件奶牛隐性乳房炎大肠杆菌的AI-2的活性检测
        1.3.6 pfs和LuxS mRNA的水平检测
            1.3.6. 1 引物设计
            1.3.6. 2 细菌总RNA的提取
            1.3.6. 4 Real-time PCR法检测mRNA转录水平
2 结果
    2.1 不同的奶牛隐性乳房炎大肠杆菌AI-2的检测
    2.2 不同生长时期E285株AI-2检测
    2.3 检测不同培养条件下奶牛隐性乳房炎大肠杆菌AI-2产生
    2.4 奶牛隐性乳房炎大肠杆菌E285株不同生长时期lux S与pfs mRNA的检测
    2.5 E285株不同培养条件下luxS基因和pfs基因mRNA的分析
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]影响禽致病性大肠杆菌信号分子AI-2产生的因素分析[J]. 白灏,韩先干,刘蕾,祁克宗,刘海文,丁铲,于圣青.  中国农业科学. 2013(15)
[2]LuxS/AI-2对伤寒沙门菌基因表达的调节[J]. 罗哲,王敏,杜鸿,王菲,孟彦辰,倪斌,徐顺高,黄新祥.  江苏大学学报(医学版). 2011(01)

硕士论文
[1]密度感应系统对弗氏志贺菌生长竞争能力的影响[D]. 徐苹.上海海洋大学 2015



本文编号：3703340