亳州市肺结核患者耐药情况及耐药相关基因分析

发布时间：2020-06-07 12:04

【摘要】：目的:了解亳州市肺结核患者的耐药流行病学情况,特别是初复治患者耐药情况的差异。了解当地耐异烟肼和利福平菌株的相关基因突变情况,探讨线性探针技术(LPA)对结核病药物检测的特异性和敏感性。为结核病疫情的发现、控制和治疗提供参考。方法:对调查期内连续纳入的痰抗酸染色阳性的肺结核病例进行统计分析。收集的痰液标本并进行体外培养;采用比例法进行药物敏感性试验,收集异烟肼利福平(RFP)、(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、氧氟沙星(OFX)和卡那霉素(KAM)6种抗结核药物的药敏试验结果。以标准质控菌株作为对照,将异烟肼(INH)和利福平(RFP)耐药的菌株,提取DNA并扩增目的基因,分析异烟肼(INH)和利福平(RFP)耐药基因的突变情况,并通过与传统药敏的比较,探讨线性探针技术(LPA)对耐多药结核病(MDR-TB)的快速诊断意义。结果:1.肺结核患者的流行病学特征本次研究纳入251例患者,男性208人,占82.87%;女性43人,占17.13%。初治患者212例,复治患者39例。年龄最小的患者15岁,最大的91岁,平均年龄为52.64岁,患者年龄主要分布在中年和老年。职业以农民为主,有232例,占92.43%;非农民只有19例。患者中,低收入人群比例较大,年人均收入低于20000元的患者人数占64.14%。初中及以下文化的低学历患者人数较多,有231例,占92.03%。2.结核分枝杆菌分离培养和总体耐药情况共培养266例阳性菌株,经菌种鉴定后,有251例为结核分枝杆菌复合群(MTB),占94.36%;15例为非结核分枝杆菌(NTM),占5.64%。故本次研究纳入有效病例251例。在251例结核分枝杆菌感染患者中,初治患者212例,复治患者39例。178例患者对6种药物全部敏感,占70.92%;有73例患者至少对一种药物耐药,总耐药率29.08%。耐药率最高的为RFP(16.33%),6种抗结核药物的总耐药率顺序为RFPINH=SMOFXEMBKAM。一线药物总耐药率27.89%,二线药物总耐药率8.37%。251例菌株共检出耐多药菌株31例,占12.35%,广泛耐药菌株3例。3.初复治患者的药敏情况比较药敏结果显示:初治耐药率25.94%,耐药率最高的为SM(15.09%),复治耐药率46.15%,耐药率最高的为RFP(43.59%)。复治患者对一线药物耐药率大于初治患者(χ~2=7.66,P0.05),对二线药物耐药率也大于初治患者(χ~2=8.89,P0.05)。复治MDR患者耐药率明显大于初治患者(χ~2=14.47,P0.05),复治患者对INH、RFP、OFX的耐药率均大于初治患者。4.罗氏培养方法和线性探针技术的性能比较以罗氏培养结果为标准,对RFP或INH耐药菌株46例采用线性探针方法检测。RFP的耐药敏感度97.5%,特异性为83.33%,一致性为0.808;INH的耐药敏感度为88.89%,特异性为90%,一致性为0.712。线性探针技术对耐多药结核病(MDR-TB)检测的灵敏度为83.33%,特异性为87.50%,一致性为0.679。线性探针和罗氏培养两种方法对MDR-TB的检出无统计学意义(χ~2=0.73,P0.05)。5.基因突变的情况40例利福平耐药的菌株,rpoB基因突变的位点主要是S531L,有27例,占67.5%。33例异烟肼耐药的菌株,突变主要是KatG基因的S315T1位点,有22例,占66.7%;7例inhA基因的突变均是C15T位点,其中3例S315T1位点也同时发生改变。结论亳州市结核病患者的耐药情况不容乐观,特别是复治患者的耐药情况较为严重。利福平和异烟肼菌株耐药基因突变与国内部分地区研究基本一致,但仍有自己的特点。线性探针技术对利福平和异烟肼的耐药检测有较高的敏感性和特异性,其结果有较好的临床应用价值。
【图文】：

结核分枝杆菌,培养基,前处理,斜面

安徽医科大学公共卫生硕士（MPH）学位论文加入 1-2 倍左右体积 4%的氢氧化钠前处理液，拧紧螺旋盖，放置在旋涡振荡器震荡 30-60 秒至标本充分混匀，室温放置 15 分钟待用。1.4.3.2.3 痰标本保存：留取涂片阳性的痰标本，放置于-20℃冰箱冻存，待分离养物合格后再销毁。1.4.3.2.4 接种：前处理完成后，用无菌吸管吸取前处理液 0.1 毫升，均匀接种支酸性罗氏培养基斜面上，37℃下保持斜面水平向上培养 24 小时，然后直立放继续培养。罗氏培养基阳性结果见图 2。

职业构成,患者,情况,非农民

分类人数构成比（%）（岁） 0～ 10 3.9821～ 64 25.5041～ 72 28.6961～ 105 41.83别男性 208 82.87女性 43 17.13业构成入研究的 251 例患者，职业以农民为主，有 232 例，占 92.43%，非农民其中学生有 4 例，企业职工 3 例，商业服务人员 3 例，事业单位员工 1输业人员 2 例，离退休人员 3 例，，其他 3 例。详情见图 3。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R446.5;R521

【参考文献】