念珠菌IgM和IgG抗体诊断肺念珠菌病应用价值的研究

发布时间：2020-06-17 07:22

【摘要】：目的:近年来念珠菌病的发病率呈逐渐上升的趋势,死亡率更是高居不下。念珠菌病的死亡率与抗真菌治疗的时间有关~([1]),不适当或延迟治疗会增加患者死亡率~([2])。快速、准确诊断念珠菌病并进行有效的治疗是成功救治、降低死亡率的基础。但念珠菌病缺乏特异性的症状,诊断念珠菌病已经成为临床医生所面临的巨大挑战。念珠菌病诊断的金标准是组织病理或无菌体液培养,但组织病理需要有创操作且敏感性低,无菌体液培养时间长、阳性率低。临床医生迫切需要快速、有效诊断念珠菌病的方法以指导治疗。胶体金免疫层析技术的发展,念珠菌抗原、抗体的发现,为检测念珠菌病提供了新的思路。本研究应用胶体金免疫层析技术,检测人血清样本中的念珠菌IgM抗体和IgG抗体,与血清G实验、BALF G实验比较,评估念珠菌IgM抗体和IgG抗体诊断肺念珠菌病的临床应用价值,寻求更加有效、简便、快速诊断念珠菌病的方法。方法:1.筛选2017年9月至2018年3月在解放军307医院呼吸与危重症科ICU和普通病房的住院患者,经知情同意后留取血液标本分别行念珠菌IgM抗体和IgG抗体检测;临床医生根据患者的病情需要送检血液、痰、BALF标本的培养、涂片、G实验和GM实验。2.分别计算IgM抗体检测、IgG抗体检测、血清G实验和BALF G实验4种方法相应的灵敏度等指标。3.分析IgM抗体和IgG抗体检测诊断肺念珠菌病的应用价值。结果:1.共筛选了76例(男38,女38)患者,其中临床诊断组患者年龄79.5±8.8岁、住院日31.5±23.2天,非真菌感染组患者年龄为69.9±11.9岁、住院日为9.8±4.2天。2.培养出的38株真菌中,白色念珠菌22株、光滑念珠菌5株、热带念珠菌2株、皱折念珠菌1株、克柔念珠菌1株、近平滑念珠菌1株,其他6株。3.76例患者全部行IgM抗体和IgG抗体检测,分别有33例和22例阳性;BALF G实验检测35例,阳性15例;血清G实验检测38例,阳性1例;痰培养65例,阳性35例;BALF培养35例,阳性12例;血培养14例,阳性0例。4.以临床诊断作为标准,IgM抗体检测灵敏度为100%、特异度为64.2%、Youden指数0.642,IgG抗体检测灵敏度为87.5%、特异度为77.9%、Youden指数0.654,血清G实验的灵敏度0%、特异度为97.1%、Youden指数㧟0.029,BALF G实验灵敏度为83.3%、特异度为65.4%、Youden指数0.487。结论:1.肺念珠菌病患者年龄大、基础疾病多、住院时间长、死亡率高;2.白色念珠菌是本次研究中最常见的致病真菌;3.诊断肺念珠菌病的金标准血培养阳性率低;4.念珠菌IgG抗体在肺念珠菌病中的诊断价值高于G实验,是较好的快速诊断指标。
【学位授予单位】：军事科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R519.3;R446.6
【图文】：

示意图,念珠菌,结果报告,示意图

图 1 念珠菌 IgM 抗体检测结果报告示意图说明：29、30、32 号试剂盒显示阳性，余为阴性，无失效试剂盒。1.3.2 念珠菌 IgG 抗体检测方法1) 准备：将念珠菌 IgG 抗体检测试剂盒从冰箱取出并恢复至室温，试剂盒打开包装后半小时内使用；2) 使用促凝采血管，抽取患者血液标本 5 mL；3) 离心：将室温静置 30 min 的血液标本使用离心机 3000 rpm 离心 10~15min；4) 稀释：取上层淡黄色血清 1μL、样本稀释液 199μL 加入到 EP 管中 1:200稀释混匀后静置 5 min；5) 加样：将打开包装试剂盒置于干净平坦的台面，吸取 80 μL 稀释后的待检样本，缓慢滴加于检测卡的加样端。6) 读取结果：5~10 分钟读取结果，10 分钟后结果可能会出现异常；

示意图,念珠菌,IgG抗体,检测结果

图 2 念珠菌 IgG 抗体检测结果报告示意图说明：29、30 号标本为阳性，余标本为阴性，无失效试剂盒。1.3.3 血液、痰液、BALF 标本的涂片、培养、G 实验和 GM 实验由本院检验科细菌室及分子室完成。1.4 统计学方法应用 SPSS l7.0 进行统计分析，连续变量采用 x ±s 表示，计数资料的组间比较进行 χ2检验（n＞40），95%可信区间，P＜0.05 时差异有统计学意义。

【参考文献】