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腹泻病毒化学发光基因芯片检测方法的建立和验证

发布时间:2017-05-03 20:10

  本文关键词:腹泻病毒化学发光基因芯片检测方法的建立和验证,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的建立一种化学发光基因芯片检测方法,实现7种腹泻病毒,A组轮状病毒、B组轮状病毒、Ⅰ型诺如病毒、Ⅱ型诺如病毒、札如病毒、星状病毒和肠道腺病毒的快速、准确检测。方法选择7种病毒特异性基因的保守区,设计引物与探针,制备寡核苷酸基因芯片。将多重实时荧光PCR(RT-PCR)扩增产物与带有特异性探针的芯片杂交,经洗涤、化学发光检测后进行结果分析。在优化的RT-PCR体系、杂交条件和化学发光检测条件下,评价芯片的灵敏度、重复性和特异性。结果研制的基因芯片具有良好的特异性和灵敏度,检测体外转录RNA参考品的最低检测限为3×103拷贝/反应,检测临床样本的灵敏度为95.2%、特异性为92.1%、符合率为95.1%。结论建立了一种基于化学发光基因芯片的腹泻病毒检测方法,此法能快速、灵敏、特异地检测和鉴别7种腹泻病毒,具有较好的应用前景。
【作者单位】: 安徽医科大学;军事医学科学院放射与辐射医学研究所;
【关键词】病毒性腹泻 腹泻病毒 基因芯片 化学发光测定法 寡核苷酸探针
【基金】:广东省科技重大专项资助项目(2012A080203005)
【分类号】:R512.5;R440
【正文快照】: 感染性腹泻呈世界性分布,发病率高、病例人数多,是仅次于呼吸道感染的第二位常见病和多发病[1]。导致感染性腹泻的病原有病毒、细菌、寄生虫,随着近些年抗生素的广泛使用和卫生条件的改善,细菌性和寄生虫性腹泻感染率有所降低[2],但病毒性腹泻未得到有效控制。引起病毒性腹泻

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