高氧抑制肠道紧密连接蛋白和肠道干细胞标记物的表达

发布时间：2024-12-19 03:51

　　目的:氧气对于机体持续产生能量是必不可少的。高氧治疗是指吸入的氧气浓度大于60%。高氧治疗广泛应用于抢救重症新生儿,它可以提高血氧分压和血氧饱和度,以满足组织器官的需氧量,消除或减少缺氧对机体的不利影响,是临床上重症新生儿急救中不可或缺的成分。虽然高氧治疗提高了患儿的生存率,但是使用不当也极易引发氧损伤,其中就包括肠道损伤,必须引起高度重视。紧密连接（tight junction,TJ）是一种多蛋白质复合物,广泛存在于所有上皮或内皮细胞连接处的最顶端,包括封闭蛋白Claudins、闭合蛋白Occludin以及闭合小带蛋白（Zonula occludens,Zos）等。肠道TJ是重要的物理屏障,受损后会引起免疫系统的过度激活,导致炎症反应,与各种肠道和全身性炎症疾病的发病密切相关。B-淋巴瘤莫洛尼氏鼠白血病病毒插入区-1（B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi1）和亮氨酸富含重复的G蛋白偶联受体5（Leucine‐rich repeat‐containing G‐protein coupled rece...

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料试剂与主要仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验动物及分组
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 细胞增殖实验(MTT)检测NCM460 细胞的生存能力
        2.2.4 免疫组织化学法检测新生大鼠肠道紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及肠道干细胞标记物Bmi1和Lgr5 的表达
        2.2.5 Western Bolt法检测新生大鼠肠道和NCM460 细胞紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及新生大鼠肠道干细胞标记物Bmi1 和Lgr5的表达
        2.2.6 RT-qPCR法检测新生大鼠肠道和NCM460 细胞紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 以及新生大鼠肠道干细胞标记物Bmi1 和Lgr5的mRNA表达
        2.2.7 统计学分析
3 结果
    3.1 高氧降低肠道紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表达量
        3.1.1 Western Blot检测Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表达量
        3.1.2 免疫组织化学法检测Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表达
    3.2 高氧降低肠道紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4的mRNA相对表达量
    3.3 高氧降低肠道干细胞标记物Bmi1、Lgr5 的蛋白表达量
        3.3.1 Western Blot检测Bmi1、Lgr5 的蛋白表达量
        3.3.2 免疫组织化学法检测Bmi1、Lgr5 的蛋白表达量
    3.4 高氧降低肠道干细胞标记物Bmi1、Lgr5的mRNA相对表达量
    3.5 抗氧化剂NAC和 Apocynin作用下,高氧中NCM460 细胞生存率变化
        3.5.1 抗氧化剂NAC(20μM)提高高氧中NCM460 细胞的生存率
        3.5.2 抗氧化剂Apocynin作用下,高氧中的NCM460 细胞生存率没有增高
    3.6 抗氧化剂NAC(20μM)作用下高氧中的NCM460 细胞紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4 的蛋白表达量增高
    3.7 抗氧化剂NAC(20μM)作用下高氧中NCM460 细胞紧密连接蛋白Zo-1、Occludin、Claudin-4的mRNA表达量增高
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：4017612