穴状稀土螯合剂的免疫标记技术研究

发布时间：2024-12-22 05:06

　　目的本研究旨在合成理想的穴状稀土螯合剂,并用于甲胎蛋白单克隆抗体(AFP-McAb)的标记,同时对标记的最佳条件进行探索,以检验自合成的穴状稀土螯合剂用于标记抗体的效果,为生物分子的标记提供参考,为进一步构建均相时间分辨荧光免疫分析奠定基础。方法以2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸乙酯为原料,优化合成Li+(?)2,6-{N,N',N,N'-[二(2,2'-联吡啶-6,6'-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸乙酯(Li+(?)bpy.bpy.py(CO2Et)2),进一步选择乙腈和甲醇两种反应体系合成 Eu3+(?)2,6-{N,N',N,N'-[二(2,2'-联吡啶-6,6'-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸乙酯(Eu3+(?)bpy.bpy.py(CO2Et)2),比较不同反应体系下合成的铕螯合物的光谱性质。将EU3+(?)bpy.bpy.py(CO2Et)2水解后的铕螯合剂Eu3+(?)2,6-{N,N',N,N'-[二(2,2'-联吡啶-6,6'-二甲基)]二(氨甲基)}-吡啶-二羧酸(Eu3+(?)bpy.bpy.py(CO2H)2)作为示踪物,经交联剂EDC和NHS...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.1交联剂EDC和NHS的反应原理

7pH9.60.5M碳酸盐缓冲溶液：称量29.3gNaHCO3、15.9gNa2CO3，置于烧杯中，加入二次蒸馏水，充分溶解，调节溶液pH，定容至1L，贴标签备用。8包被液：pH9.60.5M碳酸盐缓冲溶液50ml，加入二次蒸馏水450ml混匀，贴标....

图2.1穴状稀土螯合剂的合成路线图

以2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸乙酯为原料,首先合成,进一步选择乙腈和甲醇两种反应体系进行Eu3+配位反应[5],获得目标产物并对其激发光谱、发射光谱、荧光强度、量子产率和荧光寿命进行分析比较,同时将其水解生成合成路线如图2.1所示。2.2.12,6-二(溴甲基)吡啶-3,....

图2.2的质谱图

螯合配位稀土铕离子的质谱图MSm/z(%):,如图2.2所示,结果与其相对分子质量相符,说明该配体与铕离子间配位结合。进行酯基的水解反应,的质谱图MSm/z(%):,如图2.3所示,结果与其相对分子质量相符,说明配体上的两个酯基水解形成羧基。研究表明[61],的激发光谱为24....

图2.3的合成和质谱图

进行酯基的水解反应,的质谱图MSm/z(%):,如图2.3所示,结果与其相对分子质量相符,说明配体上的两个酯基水解形成羧基。研究表明[61],的激发光谱为240nm-340nm(最大激发波长322nm),发射光谱窄而尖锐(最大发射波长597nm和618nm),Stokes达29....

本文编号：4019480