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靶向调控Notch-1/NF-κB信号通路在脓毒症脑病中的影响评估

发布时间:2024-12-21 05:48
  目的:检测脓毒症小鼠脑组织中各种炎症介质的水平及Notch-1、NF-κB mRNA及其蛋白表达的变化,建立miR-34a过表达慢病毒的脓毒症相关脑病小鼠模型,评估其调控Notch-1/NF-1κB信号通路在脓毒症相关脑病小鼠中的作用。方法:将清洁级小鼠54只随机(随机数字法)分为假手术组(sham组,n=9,仅行腹腔切开缝合术),阴性对照组(NC组,n=15,用鞘内注射的方法注射阴性对照慢病毒(滴度为5×108TU/mL)5ul每日一次,共3天,第7天行CLP术),手术组(CLP组,n=15只,腹腔切开、盲肠结扎穿孔、腹腔缝合术),干预组(n=15只,鞘内注射miR-34a慢病毒(滴度为5×108 TU/mL)5ul共3天,第7天行CLP术),期间观察小鼠行为学改变,并于术后24h进行神经功能评分;然后麻醉后处死,留取脑组织标本。并观察脑组织病理学改变。最后用ELISA法分别测定脑组织 IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α 的水平;用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR)法测定脑组织 NF-κB mRNA、Notch...

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

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致谢
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中英文缩略词
绪论
材料与方法
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要药物及试剂
        1.3 主要仪器
    2 方法
        2.1 技术路线图
        2.2 脓毒症小鼠模型
        2.3 行为学观察及其神经功能评分表
        2.4 脑组织病理检查
        2.5 ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平
        2.6 实时荧光定量-PCR法检测NF-κB mRNA、Notch-1表达
        2.7 Western Blot法检测NF-κB、Notch-1蛋白表达
        2.8 统计学处理
3 研究结果
    3.1 术后24 h内小鼠死亡率
    3.2 术后各组小鼠行为学变化、组织变化及神经功能评分
    3.3 各组小鼠IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平的变化
    3.4 各组小鼠NF-κB mRNA、Notch-1表达的变化
    3.5 各组小鼠NF-κB、Notch-1蛋白表达的变化
    3.6 各组小鼠脑组织病理学检查
4 讨论
    4.1 关于本试验中小鼠模型
    4.2 关于SAE的发病机制
    4.3 Notch-1/NF-κB信号通路在脓毒症炎症损伤机制中的作用
    4.4 miR-34a调控Notch信号通路的机制
5 总结
6 论文实验附图
参考文献
综述
    参考文献
作者简历及在学期间所取得的科研成果



本文编号:4018500

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