马铃薯四种病害拮抗菌的筛选及发酵条件优化

发布时间：2020-07-01 20:25

【摘要】：为了寻找马铃薯枯萎病、黄萎病、黑痣病和晚疫病病菌的拮抗菌菌株,通过筛选芽孢细菌的方法,从内蒙古不同生境下的土样品分离筛选到了 92株细菌,共划分为 7 个属,分别是Bacillus、Paenibacillus、Lysobacter、Psendomonas、Brevibacillus、Ochrobactrum和Enterobacter。其中,最优势属为Bacillus,共包括了 67株、占总菌种数的73%。可以抑制马铃薯枯萎病、黄萎病、黑痣病和晚疫病的共有19株细菌,其中8株属于Bacillus、6株属于Paenibacillus、2株属于Lysobacter、2株属于Psendomonas、1株属于Brevibacillus。平板对峙试验表明,P01对马铃薯晚疫病抑制效果最好,H5对马铃薯枯萎病、黑痣病和晚疫病都有抑制作用,P16对马铃薯枯萎病、黄萎病、黑痣病和晚疫病的都有抑制效果,生防效果比较好的菌株,大多数具有固氮能力、溶无机磷能力、产铁载体能力。为了使菌株的生物量达到最好,采用单因素实验和正交实验结合的方法对拮抗效果最好的4株菌株进行了发酵条件优化。结果表明:P01菌株最佳配方为胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化钠10 g/L、蔗糖8g/L、麦芽糖10 g/L、干酪素6 g/L、硫酸镁1 g/L;最佳培养条件为pH值7.2、发酵温度28℃、发酵时间52 h、发酵转速180 r/min、接种量250 μL/50 mL。P16菌株最佳配方为胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化钠10 g/L、蔗糖8 g/L、葡萄糖6g/L、蛋白胨8 g/L、硫酸镁2.5 g/L;最佳培养条件为pH值8.0、发酵温度28℃、发酵时间35 h、发酵转速160 r/min、接种量250 μL/50 mL。H5菌株最佳配方为胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化钠10 g/L、蔗糖8 g/L、葡萄糖8 g/L、蛋白胨10 g/L、硫酸镁1.5 g/L;最佳培养条件为pH值8.0、发酵温度30℃、发酵时间24 h、发酵转速180 r/min、接种量250 μL/50 mL。K16菌株最佳配方为胰蛋白胨10 g/L、酵母提取物5 g/L、氯化钠10 g/L、蔗糖8 g/L、葡萄糖6g/L、干酪素8 g/L、磷酸氢二钾2 g/L;最佳培养条件为pH值7.2、发酵温度30℃、发酵时间47 h、发酵转速 180r/min、接种量 150 μL/50 mL。
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S435.32
【图文】：

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内蒙古农业大学硕士学位论文３．２拮抗芽孢细菌的筛选逡逑在已经纯化的９２株芽孢杆菌细菌，针对马铃薯枯萎病、马铃薯黄萎病、马黑痣病、马铃薯晚疫病病原菌进行平板对峙实验［５７］，初步筛选具有生防能力的细菌，有拮抗效果的菌株周围会产生抑菌圈，无拮抗效果的菌株会被病菌的菌盖逡逑

示意图,示意图,接菌,菌株

图４马铃薯黄萎病平板对峙实验示意图逡逑Ｆｉｇ．４邋Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ邋Ｄｉａｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｐｏｔａｔｏ邋Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ邋Ｗｉｌｔ邋ｓｔａｎｄ－ｏｆｆ邋ｏｎ邋ｆｌａｔ邋Ｐｌａｔｅ逡逑注：图４，标注有效的为马铃薯黄萎病有拮抗效果的菌株，标注ＣＫ的为不接菌的阴性对照。逡逑

【参考文献】