中红侧沟茧蜂清道夫受体的功能研究

发布时间：2020-07-25 15:44

【摘要】：中红侧沟茧蜂(Micropilits mediator)是一种昆虫内寄生蜂,其寄主涉及多种鳞翅目昆虫,包括棉铃虫(Helicoverpa armigera)、粘虫(Pseudaletia separate)和甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)等重要农业害虫,在害虫生物防治上效果显著。清道夫受体(scavenger receptors,SCRs)是细胞表面的一类跨膜糖蛋白,参与识别多种病原体。中红侧沟茧蜂有13个清道夫受体基因,研究其功能,为更好地保护和利用天敌昆虫奠定基础。本研究通过系统进化分析,确定MmSCRs与其他物种进化关系,并运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测MmSCRs基因mRNA在中红侧沟茧蜂在不同发育时期,以及感染细菌后的表达水平,通过RNA干扰技术,探究MmSCRA-1和MmCD36-1的功能。主要结果如下:(1)中红侧沟茧蜂SCR基因家族共有13个成员,包括3种类型:A型4个,B型8个,C型1个。(2)在中红侧沟茧蜂不同发育时期,MmSCRA-1基因mRNA的表达水平较高;感染革兰氏阳性菌藤黄微球菌(Micrococcus luteus)和革兰氏阴性菌阴沟肠杆菌(Enterobacter colacae)后,MmCD36-1基因mRNA的表达水平升高。(3)中红侧沟茧蜂蛹期3日龄注射dsRNA后,dsSCRA-1注射组羽化率显著低于dsGFP注射组(P0.05);蛹期3.5日龄注射dsRNA后,dsSCRA-1注射组羽化率仍显著低于dsGFP注射组(P0.05)。(4)干扰MmCD36-1基因后,中红侧沟茧蜂存活率与对照组无显著差异。干扰后感染藤黄微球菌,中红侧沟茧蜂存活率与对照组无显著差异,而干扰后感染阴沟肠杆菌,中红侧沟茧蜂存活率与对照组有极显著差异(P0.001)。(5)干扰MmCD36-1基因后感染藤黄微球菌,24 h内中红侧沟茧蜂体内菌落数显著多于对照组(P0.05);干扰MmCD36-1基因后感染阴沟肠杆菌,18 h内中红侧沟茧蜂体内菌落数逐渐增多,与对照组有显著差异(P0.01)。综上所述,我们的结果表明,MmSCRA-1基因在中红侧沟茧蜂蛹期发育过程中起到关键作用;MmCD36-1基因参与中红侧沟茧蜂清除细菌的过程,帮助寄生蜂抵御细菌入侵。
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S476.3
【图文】：

图 1-1 清道夫受体家族结构域（Canton et al., 2013）Fig. 1-1 Functional domain of scavenger receptor family（Canton et al., 2013）目前，C 型清道夫受体只在无脊椎动物中有报道。黑腹果蝇（Drelanogaster）C 型清道夫受体有 SR-CⅠ、SR-CⅡ、SR-CⅢ、SR-CⅣ四种（图 端都含有两个补体调控蛋白（complement control protein, CCP）结构域及 MA（R met et al., 2001; Lazzaro, 2005）。最近有研究发现，在黄粉虫（Tenebrio m本对虾（Marsupenaeus japonicus）中也存在 C 型清道夫受体（Kim et al., 2017l., 2016）。

图 1-1 清道夫受体家族结构域（Canton et al., 2013）Fig. 1-1 Functional domain of scavenger receptor family（Canton et al., 2013）目前，C 型清道夫受体只在无脊椎动物中有报道。黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）C 型清道夫受体有 SR-CⅠ、SR-CⅡ、SR-CⅢ、SR-CⅣ四种（图 1-2），N 端都含有两个补体调控蛋白（complement control protein, CCP）结构域及 MAM 结构域（R met et al., 2001; Lazzaro, 2005）。最近有研究发现，在黄粉虫（Tenebrio molitor）、日本对虾（Marsupenaeus japonicus）中也存在 C 型清道夫受体（Kim et al., 2017; Yang etal., 2016）。

与细胞表面的 GNBP（Gramnegative bacteria-binding protein）结合后，使下游细胞Sp tzle 发生剪切并激活的 Toll 通路，二是革兰氏阴性菌表面的 DAP-型肽聚糖（DAPpeptidoglycan），与细胞表面的肽聚糖识别蛋白（peptidoglycan recognition protein, PGPGRP-LC 和细胞质内的 PGRP-LE 结合，激活的 Imd 途径（immune deficiency pathw两种信号途径都受核转录因子 NF-κB 的调控，使抗菌肽基因表达产生抗菌肽，从而病原物（Otto et al., 2016）。

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本文编号：2770026