嫁接山核桃抗干腐病生化机理研究

发布时间：2020-09-29 18:25

　　 山核桃干腐病是山核桃生产中最主要病害,严重影响了山核桃产业的可持续发展。在种植中,临安实生山核桃发病严重,但是美国砧木嫁接临安实生山核桃(文中简称美国嫁接山核桃)和湖南砧木嫁接临安实生山核桃(文中简称湖南嫁接山核桃)发病较轻。本文以临安实生山核桃、美国嫁接山核桃、湖南嫁接山核桃、美国薄壳山核桃和湖南实生山核桃为材料,测定树干和树根中酚酸含量、生物碱含量和过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性之间的差异并分析与感病指数之间的关系,初步探讨嫁接山核桃抗干腐病的机理,为临安实生山核桃干腐病的预防与控制提供科学依据。主要取得了以下结果:1通过对山核桃林间干腐病调查,发现临安实生山核桃的感病指数最高,发病程度严重;美国嫁接山核桃和湖南嫁接山核桃的感病指数低,发病程度较轻微。2年生的山核桃较少感染干腐病,10年生的山核桃感病严重。2 HPLC-SPE法测定山核桃树干和树根中酚酸种类和含量,发现均含有没食子酸和绿原酸。树干中,嫁接山核桃的总酚酸含量显著高于临安实生山核桃;树根中,2年生的嫁接山核桃总酚酸含量低于临安实生山核桃,10年生时高于临安实生山核桃。随着树龄增加,树干和树根中总酚酸含量都增加。在临安实生山核桃、美国嫁接山核桃和湖南嫁接山核桃中,2年生与10年生树干中总酚酸含量与感病指数间相关系数分别为0.943和0.768,呈显著负相关关系。树干中总酚酸含量越高,感病指数越低,抗性越强;树根中总酚酸含量与感病指数无明显相关性。3临安实生山核桃、美国嫁接山核桃和湖南嫁接山核桃的树干和树根中总生物碱含量无显著差异。随着树龄增加,5种试材的树干中总生物碱含量都显著减少,树根中除了美国薄壳山核桃显著增加,其它试材都无明显变化。2年生树干和树根与感病指数间呈微弱的负相关关系;10年生树干和树根与感病指数为不显著弱正相关关系。树干和树根中总生物碱含量可能影响山核桃的抗病性,但这种相关性不明显。4嫁接山核桃树干和树根中CAT活性和POD活性都高于临安实生山核桃。随着树龄增加,不同试材的CAT活性、POD活性和SOD活性都升高,PPO活性下降。2年生和10年生山核桃树干中CAT活性与感病指数的相关系数分别0.834和0.645,2年生和10年生POD活性与感病指数相关系数分别0.834和0.645,树干中CAT活性POD活性呈显著负相关。PPO活性和SOD活性与感病指数的相关系数小,无明显的相关性。树根中的酶活性与感病指数之间都无明显的相关性。因此,树干中CAT和POD活性越高,山核桃的抗病性越强。
【学位单位】：浙江农林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S436.64
【部分图文】：

用固相萃取法，对样品提取液进一步纯化。固相萃取步骤为：3ml 甲醇、3ml 水活5ml 样品溶液过柱，3ml 的 10%甲醇-0.1%甲酸淋洗液过柱以去除杂质，5ml 的甲醇甲酸洗脱液将目标物洗脱出来，收集洗脱液。将样品洗脱液旋蒸浓缩至 2ml，0.45滤膜过滤，收集滤液。3.2.3 标准品溶液的配制称取没食子酸标准品和绿原酸标准品 0.01g,置于 50ml 容量瓶中，加甲醇溶解定容至刻度，制得没食子酸和绿原酸混合标准储备液（0.2mg/ml）；用移液枪分别混合标准储备液 0.025、3.775、7.525、11.275、15.025ml,用甲醇定容至 50ml 容量中，得 0.1、15.1、30.1、45.1、60.1μg/ml 的标准溶液。3.2.4 系统适用性试验按照上述色谱条件，分别精密吸取混合标准溶液和十组样品溶液各 20μL，注HPLC 仪。结果从色谱图中可以发现峰形良好，保留时间适中，分离度大于 1.2，40中内可完成整个分离分析过程，标准品 HPLC 色谱图见图 3.1。

图 3.32 年生山核桃树干（左）和树根（右）中酚酸 HPLC 色谱图Figure3.3 HPLC chromatograms of phenolic acids in trunks(left) and roots (right) of 2-year-old hickory注：A 临安实生山核桃 B 美国嫁接山核桃 C 湖南嫁接山核桃 D 美国薄壳山核桃 E 湖南实生山核桃

15图 3.410 年生山核桃树干（左）和树根（右）中酚酸 HPLC 色谱图Figure3.4 HPLC chromatograms of phenolic acids in trunks(left) and roots (right) of 10-year-oldhickory注：A 临安实生山核桃 B 美国嫁接山核桃 C 湖南嫁接山核桃 D 美国薄壳山核桃 E 湖南实生山核桃

【参考文献】

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本文编号：2830091