大白菜软腐病新病原菌Pantoea agglomerans鉴定及抗性鉴定方法

发布时间:2020-10-16 00:47
   软腐病是大白菜包心后期的主要病害,又称水腐病和腐烂病,发生在各个地区。随着生产面积的逐步扩大和连年种植,该病害在主要产区有逐渐蔓延的趋势,其致病菌常为胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum subsp.Carotovorum简称Pcc)。近几年,在中国黑龙江省哈尔滨市发现了一种具有类似软腐病症的新病,其腐烂斑点首先在外叶的叶柄基部观察到,逐渐发展和扩大、甚至整株植株腐烂。与Pcc引起的软腐病症状不同,腐烂颜色较深,没有明显的臭味,中肋纤维分解较慢,短缩茎不易腐烂、易长侧芽。本文研究通过一系列生物学鉴定和分子鉴定,确定哈尔滨地区引起大白菜软腐病的病原菌,并进行致病力测定和抗性鉴定方法研究。其得到结果如下:(1)通过对哈尔滨及其周边地区大白菜软腐病植株上分离的5株病原菌的菌落特征、革兰氏染色、鞭毛染色进行鉴定,确定大白菜软腐病新的病原菌为泛菌属(Pantoea)。(2)对分离得到的5株病原菌进行致病力测定,结果显示:接种1、3、5号菌株的植株病症与田间大白菜软腐病新的病症相同,而2、4号菌株发病病症则略有不同,因此1、3和5号菌株很可能是大白菜软腐病的致病菌。(3)通过利用16S rDNA,DNA gyrase subunit B(gyrB)基因和RNA polymerase sigma factor(rpoD)基因对5株病原菌进行了分子鉴定,确定1、3、5号菌株为成团泛菌(Pantoea agglomerans),2、4号菌株则为菠萝泛菌(Pantoea ananatis)。且1、3、5号菌株的16S rDNA序列GenBank登录号为MK335467、MK335468和MK335469;基于gyrB基因和rpoD基因序列GenBank登录号为MK439934、MK439935、MK439936和MK439937、MK439938、MK439939。(4)对成团泛菌进行生物学特性鉴定:1)最适生长温度为30℃,致死温度为41℃。2)革兰氏反应为阴性,周生鞭毛;兼性厌气,没有气体发酵;菌落可或不可产生黄色色素。3)可以利用D-核糖,D-甘露糖醇,D-果糖,海藻糖产酸。4)可利用蔗糖和葡萄糖作为碳源,而不能利用硝酸盐等作氮源。5)氧化酶活性反应测定为阴性;过氧化氢试验呈阳性;能生成硫化氢;甲基红反应为阴性。(5)试验初步建立了一套大白菜对成团泛菌的抗性鉴定方法。最佳接种方法为伤口滴接;菌悬液最佳接种浓度为10~(12)个/mL;最佳接种温度为白天30℃/黑夜25℃;接种最佳苗龄是7-8片叶期;湿度是90-100%为最佳。
【学位单位】:东北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:S436.341.13
【部分图文】:

症状


田间大白菜软腐病症状Figure3-1Chinesecabbagesoftrotsymptomsinthefieldc

成团泛菌,菠萝


注:a.b:成团泛菌;c.d:菠萝泛菌Note:a.b.Pantoea agglomerans;c.d.Pantoea ananatis .图 3-3 田间接种大白菜软腐病病症Figure 3-3 The soft rot symptoms of Chinese cabbage in the fielddc

活体,温室,成团泛菌,菠萝


17注:a.b:成团泛菌;c.d:菠萝泛菌Note:a.b.Pantoea agglomerans;c.d.Pantoea ananatis .图 3-4 温室内活体接种大白菜软腐病病症Figure 3-4 The soft rot symptoms of Chinese cabbage in the greenhousecd
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本文编号:2842489

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