进境多年生黑麦草和白三叶种带真菌多样性研究
发布时间：2021-04-09 16:45
我国每年需进口大量草坪草和牧草种子,而草种携带的部分病原真菌对种子发芽、种苗活力具有一定负作用,严重影响农业发展。因此,对其进行快速检测鉴定以及系统研究极其重要。本研究比较了3种基因组DNA提取方法,进一步利用高通量测序技术分析了来源于不同国家的4份多年生黑麦草（Lolium perenne）和5份白三叶（Trifolium repens）种子携带真菌的多样性,并将其与传统分离鉴定结果进行了比较;同时基于DNA条形码技术对重要植物病原真菌镰刀菌（Fusarium spp.）进行快速检测鉴定研究。主要研究结果如下:1.采用CTAB法、尿素法和试剂盒法3种方法提取基因组DNA,比较分析各方法的提取效率。结果表明,尿素法提取的基因组OD260/280值接近于1.80,蛋白质抽提效果较好,含杂质较少,浓度最高达到886.5 ng·μL-1,电泳检测结果条带明亮单一、无拖尾现象,完成过程步骤少、耗时短,优于其他2种方法。2.利用高通量测序技术分析了来源于不同国家的4份多年生黑麦草（L.perenne）和5份白三叶（T.repens）种子携带真菌的多样性。结果表明,不同来源种子携带真菌差异较大,主...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PDA培养基烟曲霉A.fumigatus、黑曲霉A.niger和土曲霉A.terreus形态特征
图 2-2 PDA 培养基链格孢 A. alternata 和感染链格孢 A. infectoria 形态特征注：图片第一列为菌落正面、第二列为菌落反面、第三列为 400 显微镜下照片，第一行为A. alternata 形态特征，第二行为 A. infectoria 形态特征。枝状枝孢 C. cladosporioides，在 25℃条件下 PDA 培养基上生长 14 d 后菌落直径 50 mm，菌落深绿色，具有较粗的褶皱，背面墨绿色，分生孢子簇生，椭圆形至梭型，平均大小为 5.6×3.5 μm。极细枝孢 C. tenuissimum，在 25℃条件下 PDA培养基上生长 14 d 后菌落直径 41 mm，菌落深绿色，具有较细的褶皱，背面墨绿色，分生孢子梗单生、直立、有隔膜，分生孢子为链生，椭圆形或近球形，直径范围为 3.0～5.0 μm(图 2-3)。
图 2-3 PDA 培养基枝状枝孢 C. cladosporioides、极细枝孢 C. tenuissimum 形态特征注：图片第一列为菌落正面、第二列为菌落反面、第三列为 400 显微镜照片，第一行为枝状枝孢形态特征，第二行为极细枝孢形态特征。易脆毛霉 Mucor fragilis，毛霉亚门，毛霉目，毛霉科，毛霉属中的一个种，在 25℃条件下 PDA 培养基上菌丝生长迅速，覆盖整个培养基，但在 PDA 培养基上不产孢(图 2-4)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Diversity Analysis of Endophytic Fungi in Mentha Using Illumina MiSeq High-throughput Sequencing Technology[J]. Zebin CHEN,Tiyuan XIA,Dingkang WANG,Guoxing WU,Jiani LIU,Yongfu ZHANG,Zhen REN,Song JIN,Shengjing PENG,Yanfen NIU. Medicinal Plant. 2016(Z1)
[2]高通量测序法对清香大曲真菌群落结构的分析[J]. 乔晓梅,赵景龙,杜小威,张秀红. 酿酒科技. 2015(04)
[3]高通量测序技术及其在检验检疫中的应用展望[J]. 潘嵩,陈岩,朱水芳. 植物检疫. 2014(05)
[4]基于多基因序列分析对尖孢镰孢菌古巴专化型(香蕉枯萎病菌)生理小种的鉴定[J]. 曾莉莎,吕顺,刘文清,赵志慧,王芳,周建坤,李洪波,陈石,杜彩娴. 菌物学报. 2014(04)
[5]一种提取真菌基因组DNA的新方法[J]. 蔡文娇,徐大彬,蓝霞,谢红辉,韦继光. 农业研究与应用. 2014(03)
[6]甘草根腐病病原菌鉴定[J]. 曹雪梅,李生兵,张惠玲,胡小平. 植物病理学报. 2014(02)
[7]利用高通量测序分析云南豆豉中细菌群落多样性[J]. 李晓然,李洁,刘晓峰,冯阳,柳陈坚. 食品与生物技术学报. 2014(02)
[8]镰刀菌属真菌毒素的研究进展[J]. 张卫娜,贾谏,陆晓宇,陈中健,孔谦,陈庄. 广东农业科学. 2013(15)
[9]DNA条形码技术及其在真菌研究中的应用[J]. 林惠娇,蒋湘,王新国,王卫芳. 植物检疫. 2013(02)
[10]一种改良的植物DNA提取方法[J]. 李金璐,王硕,于婧,王玲,周世良. 植物学报. 2013(01)
博士论文
[1]土壤病原真菌的检测及土壤中真菌群落多样性的研究[D]. 赵爽.南京农业大学 2012
[2]种带真菌对多年生黑麦草（Lolium Perenne L.）种子质量的影响[D]. 张颖.中国农业大学 2005
[3]禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）致病力鉴定、毒素检测及其分子生物学研究[D]. 武爱波.华中农业大学 2005
硕士论文
[1]两种地衣中内生真菌物种多样性的比较研究[D]. 邹运.山东师范大学 2015
本文编号：3127968
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PDA培养基烟曲霉A.fumigatus、黑曲霉A.niger和土曲霉A.terreus形态特征
图 2-2 PDA 培养基链格孢 A. alternata 和感染链格孢 A. infectoria 形态特征注：图片第一列为菌落正面、第二列为菌落反面、第三列为 400 显微镜下照片，第一行为A. alternata 形态特征，第二行为 A. infectoria 形态特征。枝状枝孢 C. cladosporioides，在 25℃条件下 PDA 培养基上生长 14 d 后菌落直径 50 mm，菌落深绿色，具有较粗的褶皱，背面墨绿色，分生孢子簇生，椭圆形至梭型，平均大小为 5.6×3.5 μm。极细枝孢 C. tenuissimum，在 25℃条件下 PDA培养基上生长 14 d 后菌落直径 41 mm，菌落深绿色，具有较细的褶皱，背面墨绿色，分生孢子梗单生、直立、有隔膜，分生孢子为链生，椭圆形或近球形，直径范围为 3.0～5.0 μm(图 2-3)。
图 2-3 PDA 培养基枝状枝孢 C. cladosporioides、极细枝孢 C. tenuissimum 形态特征注：图片第一列为菌落正面、第二列为菌落反面、第三列为 400 显微镜照片，第一行为枝状枝孢形态特征，第二行为极细枝孢形态特征。易脆毛霉 Mucor fragilis，毛霉亚门，毛霉目，毛霉科，毛霉属中的一个种，在 25℃条件下 PDA 培养基上菌丝生长迅速，覆盖整个培养基，但在 PDA 培养基上不产孢(图 2-4)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Diversity Analysis of Endophytic Fungi in Mentha Using Illumina MiSeq High-throughput Sequencing Technology[J]. Zebin CHEN,Tiyuan XIA,Dingkang WANG,Guoxing WU,Jiani LIU,Yongfu ZHANG,Zhen REN,Song JIN,Shengjing PENG,Yanfen NIU. Medicinal Plant. 2016(Z1)
[2]高通量测序法对清香大曲真菌群落结构的分析[J]. 乔晓梅,赵景龙,杜小威,张秀红. 酿酒科技. 2015(04)
[3]高通量测序技术及其在检验检疫中的应用展望[J]. 潘嵩,陈岩,朱水芳. 植物检疫. 2014(05)
[4]基于多基因序列分析对尖孢镰孢菌古巴专化型(香蕉枯萎病菌)生理小种的鉴定[J]. 曾莉莎,吕顺,刘文清,赵志慧,王芳,周建坤,李洪波,陈石,杜彩娴. 菌物学报. 2014(04)
[5]一种提取真菌基因组DNA的新方法[J]. 蔡文娇,徐大彬,蓝霞,谢红辉,韦继光. 农业研究与应用. 2014(03)
[6]甘草根腐病病原菌鉴定[J]. 曹雪梅,李生兵,张惠玲,胡小平. 植物病理学报. 2014(02)
[7]利用高通量测序分析云南豆豉中细菌群落多样性[J]. 李晓然,李洁,刘晓峰,冯阳,柳陈坚. 食品与生物技术学报. 2014(02)
[8]镰刀菌属真菌毒素的研究进展[J]. 张卫娜,贾谏,陆晓宇,陈中健,孔谦,陈庄. 广东农业科学. 2013(15)
[9]DNA条形码技术及其在真菌研究中的应用[J]. 林惠娇,蒋湘,王新国,王卫芳. 植物检疫. 2013(02)
[10]一种改良的植物DNA提取方法[J]. 李金璐,王硕,于婧,王玲,周世良. 植物学报. 2013(01)
博士论文
[1]土壤病原真菌的检测及土壤中真菌群落多样性的研究[D]. 赵爽.南京农业大学 2012
[2]种带真菌对多年生黑麦草（Lolium Perenne L.）种子质量的影响[D]. 张颖.中国农业大学 2005
[3]禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）致病力鉴定、毒素检测及其分子生物学研究[D]. 武爱波.华中农业大学 2005
硕士论文
[1]两种地衣中内生真菌物种多样性的比较研究[D]. 邹运.山东师范大学 2015
本文编号：3127968
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