中华蜜蜂囊状幼虫病病毒单克隆抗体的制备与琼脂扩散检测方法的建立

发布时间：2021-05-18 07:30

　　目的本实验以纯化的中华蜜蜂囊状幼虫病毒（CSBV）作为抗原,免疫BALB/c小鼠,制备抗CSBV单克隆抗体,并对其效价、特异性和病毒中和能力进行检测。在此基础上,用制备的抗CSBV单克隆抗体作为诊断抗体,建立一种检测CSBV的琼脂扩散检测方法。方法本实验利用纯化的CSBV作为抗原免疫Balb/c小鼠,经过3次免疫后,小鼠断尾采血测其血清效价,选择效价较高的小鼠,在细胞融合前3⁴ d再加强免疫一次。取免疫小鼠脾淋巴细胞通过杂交瘤技术与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用间接ELISA筛选阳性细胞株并通过有限稀释的方法进行3次亚克隆后,制备腹水型单克隆抗体。获得能稳定分泌抗CSBV的单克隆抗体,利用间接ELISA方法检测抗体效价及其特异性。将以纯化好的腹水单克隆抗体分别与CSBV互作后,接种于2³日龄中华蜜蜂幼虫,通过观察幼虫死亡率鉴定抗体的中和作用。在此基础上,以制备的抗CSBV单克隆抗体作为诊断抗体,,通过对琼脂板配置条件、琼脂扩散的观察时间、CSBV的最佳稀释浓度和抗CSBV单克隆抗体的稀释度进行优化,建立一种用于检测CSBV的琼脂扩散检测... 

【文章来源】：锦州医科大学辽宁省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略语表
前言
第一章 文献综述
    1.1 中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)的研究概况与致病特性分析
    1.2 中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)检测技术的现状
    1.3 单克隆抗体的概述
    1.4 琼脂扩散检测方法的探讨
第二章 CSBV单克隆抗体的制备与鉴定
    2.1 材料与方法
    2.2 结果
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 中蜂囊状幼虫病毒琼脂扩散检测方法的建立
    3.1 材料与方法
    3.2 结果
    3.3 讨论
    3.4 小结
结论与创新点
参考文献
致谢
个人简介
攻读学位论文期间发表文章



本文编号：3193401