小麦抗条锈病基因Yr26候选基因的筛选和克隆
发布时间：2021-07-07 16:07
小麦条锈病是由条形柄锈菌（Puccinia striiformis f.sp.tritici）侵染引起的一种严重的小麦真菌病害。小麦条锈病在中国的危害范围很广,对小麦的生产造成严重威胁,因此,培育和推广抗病品种是预防和控制条锈病最有效的措施。Yr26基因是从南京农业大学细胞遗传所培育的普通小麦-簇毛麦易位系材料中挖掘出的抗条锈病基因,该基因曾对中国条锈菌优势小种具有有效抗性并在生产上发挥了巨大作用,但这几年发现其抗性被新小种所克服。Ma等（2001）研究发现该基因由显性单基因控制,并将其定位于1B上,同时根据系谱分析推测该基因可能来自初始杂交亲本之一圆锥小麦γ-80。王春梅等（2008）将Yr26定位于小麦1B染色体的缺失系C-1BL-6-0.32内,Zhang等（2013）等通过构建高密度遗传图谱,将Yr26定位到CON-4和CON-12这两个分子标记之间,它们与Yr26的遗传距离分别为0.08 cM和0.17cM。由于Yr26定位于小麦1B染色体近着丝粒区域,该区域重组率低,给图位克隆带来了很大困难。本研究尝试综合利用表达谱基因芯片、SNP芯片和转录组测序技术,同时结合精细定位的信...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２夏孢子侵染过程（Ｃｈｅｎ以以．，２０１４）??
?一???互作机制解析打下基础。由于小麦基因组庞大，｝定位于小麦１Ｂ染色体近着丝粒区??域，该区域重组率较低，通过图位克隆的方法对斤２（５基因进行克隆比较困难。为此，??本研究利用表达谱基因芯片技术、ＳＮＰ芯片技术和转录组测序技术，并结合精细??定位的信息，通过比较基因组的方法筛选位于ｒ／＊２（５区段的候选基因并对其进行克隆分??析，同时利用病毒诱导基因沉默技术和转基因技术验证这些基因的功能，为｝＞２６介导??的小麦抗条锈病分子机理研究提供依据。??９技术路线??本研究利用ＳＮＰ芯片技术和转录组测序技术筛选出位于｝＞２６区段内的功能基因，??对这些基因进行表达分析和克隆分析，同时设计标记，以期对｝＞２（５区段进行加密。同??时利用基因芯片技术获得的抗感材料受条锈菌诱导前、后的基因表达谱，筛选出差异??表达基因，并结合精细定位的结果，筛选出候选基因并进行了克隆分析，并利用??转基因技术和病毒诱导基因沉默技术对其功能进行研究。??，９２Ｒ１３７筠扬１５８??
０１２３４５６７?８９??图４－１小麦条锈病苗期反应型的分级标准??Ｆｉｇｕｒｅ?４－１?Ｓｃａｌｅ?ｏｆ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?Ｐｓｔ?ｐａｔｈｏｇｅｎ?ｏｎ?ｗｈｅａｔ?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ??．７?转基因功能分析??．７．１受体材料准备??转基因受体小麦扬麦１５８种植于南京农业大学江浦试验基地，待植株开花后１４天、幼胚大小约为１ｍｍ时大量取穂。在实验室将种子剥出，用７０％酒精表ｌｍｉｎ后弃废液，之后用加入１５％的ＮａＣＩＯ，置于摇床上摇丨Ｏｍｉｎ，弃废液后用冲洗４－５次。在超净工作台上用解剖刀或者镊子剥肝，胚的盾片朝上放于诱上，２５°Ｃ暗培养一周后准备基因枪轰击。??．７．２培养基的配置??转化所用培养基：??
【参考文献】：
期刊论文
[1]小麦条锈菌致病性及其变异研究进展[J]. 康振生,王晓杰,赵杰,汤春蕾,黄丽丽. 中国农业科学. 2015(17)
[2]中国小麦条锈病综合治理理论与实践[J]. 陈万权,康振生,马占鸿,徐世昌,金社林,姜玉英. 中国农业科学. 2013(20)
[3]Draft genome of the wheat A-genome progenitor Triticum urartu[J]. Science Foundation in China. 2013(02)
[4]中国小麦条锈菌转主寄主小檗的鉴定[J]. 赵杰,张宏昌,姚娟妮,黄丽丽,康振生. 菌物学报. 2011(06)
[5]用基因芯片技术分析干旱胁迫下生殖生长期大麦的基因表达(英文)[J]. 郭培国,Michael Baum,李荣华,Stefania Grando,Rajeev K Varshney,Andreas Graner,Salvatore Ceccarelli,Jan Valkoun. 广州大学学报(自然科学版). 2007(05)
[6]小麦条锈菌夏孢子阶段核相状况的研究[J]. 康振生,李振岐,商鸿生. 植物病理学报. 1994(01)
博士论文
[1]几个小麦品种（系）抗条锈基因的遗传分析和分子作图[D]. 周新力.西北农林科技大学 2011
[2]小麦抗条锈病基因Yr26的分子标记及黑麦1R、鹅观草1Rk～（#1）与簇毛麦1V和6VS特异分子标记的开发[D]. 王春梅.南京农业大学 2007
硕士论文
[1]小麦抗条锈病Yr26相关基因的筛选和克隆[D]. 邢书娟.南京农业大学 2015
本文编号：3269940
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２夏孢子侵染过程（Ｃｈｅｎ以以．，２０１４）??
?一???互作机制解析打下基础。由于小麦基因组庞大，｝定位于小麦１Ｂ染色体近着丝粒区??域，该区域重组率较低，通过图位克隆的方法对斤２（５基因进行克隆比较困难。为此，??本研究利用表达谱基因芯片技术、ＳＮＰ芯片技术和转录组测序技术，并结合精细??定位的信息，通过比较基因组的方法筛选位于ｒ／＊２（５区段的候选基因并对其进行克隆分??析，同时利用病毒诱导基因沉默技术和转基因技术验证这些基因的功能，为｝＞２６介导??的小麦抗条锈病分子机理研究提供依据。??９技术路线??本研究利用ＳＮＰ芯片技术和转录组测序技术筛选出位于｝＞２６区段内的功能基因，??对这些基因进行表达分析和克隆分析，同时设计标记，以期对｝＞２（５区段进行加密。同??时利用基因芯片技术获得的抗感材料受条锈菌诱导前、后的基因表达谱，筛选出差异??表达基因，并结合精细定位的结果，筛选出候选基因并进行了克隆分析，并利用??转基因技术和病毒诱导基因沉默技术对其功能进行研究。??，９２Ｒ１３７筠扬１５８??
０１２３４５６７?８９??图４－１小麦条锈病苗期反应型的分级标准??Ｆｉｇｕｒｅ?４－１?Ｓｃａｌｅ?ｏｆ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?Ｐｓｔ?ｐａｔｈｏｇｅｎ?ｏｎ?ｗｈｅａｔ?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ??．７?转基因功能分析??．７．１受体材料准备??转基因受体小麦扬麦１５８种植于南京农业大学江浦试验基地，待植株开花后１４天、幼胚大小约为１ｍｍ时大量取穂。在实验室将种子剥出，用７０％酒精表ｌｍｉｎ后弃废液，之后用加入１５％的ＮａＣＩＯ，置于摇床上摇丨Ｏｍｉｎ，弃废液后用冲洗４－５次。在超净工作台上用解剖刀或者镊子剥肝，胚的盾片朝上放于诱上，２５°Ｃ暗培养一周后准备基因枪轰击。??．７．２培养基的配置??转化所用培养基：??
【参考文献】：
期刊论文
[1]小麦条锈菌致病性及其变异研究进展[J]. 康振生,王晓杰,赵杰,汤春蕾,黄丽丽. 中国农业科学. 2015(17)
[2]中国小麦条锈病综合治理理论与实践[J]. 陈万权,康振生,马占鸿,徐世昌,金社林,姜玉英. 中国农业科学. 2013(20)
[3]Draft genome of the wheat A-genome progenitor Triticum urartu[J]. Science Foundation in China. 2013(02)
[4]中国小麦条锈菌转主寄主小檗的鉴定[J]. 赵杰,张宏昌,姚娟妮,黄丽丽,康振生. 菌物学报. 2011(06)
[5]用基因芯片技术分析干旱胁迫下生殖生长期大麦的基因表达(英文)[J]. 郭培国,Michael Baum,李荣华,Stefania Grando,Rajeev K Varshney,Andreas Graner,Salvatore Ceccarelli,Jan Valkoun. 广州大学学报(自然科学版). 2007(05)
[6]小麦条锈菌夏孢子阶段核相状况的研究[J]. 康振生,李振岐,商鸿生. 植物病理学报. 1994(01)
博士论文
[1]几个小麦品种（系）抗条锈基因的遗传分析和分子作图[D]. 周新力.西北农林科技大学 2011
[2]小麦抗条锈病基因Yr26的分子标记及黑麦1R、鹅观草1Rk～（#1）与簇毛麦1V和6VS特异分子标记的开发[D]. 王春梅.南京农业大学 2007
硕士论文
[1]小麦抗条锈病Yr26相关基因的筛选和克隆[D]. 邢书娟.南京农业大学 2015
本文编号：3269940
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